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文檔簡介
1、真菌感染的日益嚴重、病原菌對抗真菌藥物的耐藥性問題以及抗真菌藥物的潛在毒性問題增加了研發(fā)出高效低毒的抗真菌藥物的緊迫性。而分子生物學(xué)、結(jié)構(gòu)生物學(xué)、基因工程技術(shù)等新興學(xué)科、新技術(shù)在抗真菌藥物研發(fā)中的應(yīng)用，使開發(fā)具有抗真菌活性的抗真菌肽成為研發(fā)新型抗真菌藥物的熱點。嗜鉻粒蛋白(Chromogranin A)是存在于動物分泌細胞的由439個氨基酸組成的酸性可溶性蛋白。近年的研究發(fā)現(xiàn)CGA的N端具有抗血管收縮、抗細菌和抗真菌的功能，是一類很有研
2、究價值的多肽。 本研究應(yīng)用PCR技術(shù)擴增了CGA N端編碼31-76位氨基酸的DNA片段(CGA N46)，并將其克隆至大腸桿菌表達載體pET-15b中，獲得含有N46基因的重組質(zhì)粒pET-N46，轉(zhuǎn)化大腸桿菌BL21(DE3)，構(gòu)建了能表達N46蛋白的大腸桿菌工程菌BL21(DE3，pET-N46)。SDS-PAGE及Western-Blotting結(jié)果表明，在IPTG誘導(dǎo)下，N46蛋白基因在BL2l(DE3，pET-N46)
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