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文檔簡(jiǎn)介
1、目的:
通過觀察活血通督湯對(duì)家兔脊髓缺血再灌注損傷后肢運(yùn)動(dòng)功能及細(xì)胞凋亡因子c-fos、c-jun表達(dá)的影響,探討該方的作用機(jī)制。
方法:
1、后肢運(yùn)動(dòng)功能的作用觀察:24只新西蘭家兔,雌雄不限,體重2000±200g,按照隨機(jī)數(shù)字法分為假手術(shù)組,缺血再灌注組,活血通督湯組,每組8只。假手術(shù)組:生理鹽水灌胃,b.i.d,術(shù)前1周,術(shù)后3周;缺血再灌注組:生理鹽水灌胃,b.i.d,術(shù)前1周,術(shù)后3周;活血通督
2、湯組:活血通督湯灌胃,b.i.d,術(shù)前1周,術(shù)后3周。假手術(shù)組僅分離L3-6,缺血再灌注組及活血通督湯組分離并夾閉L3-6,30min后松開動(dòng)脈夾恢復(fù)血流制成脊髓缺血再灌注損傷模型。觀察再灌注8h、24h、1w、2w、3w共五個(gè)時(shí)間點(diǎn)的后肢運(yùn)動(dòng)功能并采用Jacobs法對(duì)家兔后肢運(yùn)動(dòng)功能評(píng)分。
2、機(jī)制探討:96只新西蘭家兔,雌雄不限,體重2000±200g,按照隨機(jī)數(shù)字法分為假手術(shù)組、缺血再灌注組、活血通督湯組,每組32只。每
3、組中再分為再灌注0.5h、1h、4h、8h四個(gè)亞組,每個(gè)亞組8只家兔。假手術(shù)組:生理鹽水灌胃,b.i.d,術(shù)前1周;缺血再灌注組:生理鹽水灌胃,b.i.d,術(shù)前1周;活血通督湯組:活血通督湯灌胃,b.i.d,術(shù)前1周。假手術(shù)組僅分離L3-6,缺血再灌注組及活血通督湯組分離并夾閉L3-6,30min后松開動(dòng)脈夾恢復(fù)血流制成脊髓缺血再灌注損傷模型。三組分別于造模成功后再灌注0.5h、1h、4h、8h共四個(gè)時(shí)間點(diǎn)取家兔的脊髓,采用Wester
4、n-blot法檢測(cè)脊髓組織中c-fos、c-jun蛋白的含量,并用免疫組化法檢測(cè)脊髓組織c-fos、c-jun陽性細(xì)胞的表達(dá)量。
結(jié)果:
1、在脊髓缺血再灌注8h、24h、1w、2w、3w共五個(gè)時(shí)間點(diǎn),假手術(shù)組的后肢運(yùn)動(dòng)功能均正常,與術(shù)前無明顯變化;缺血再灌注組及活血通督湯組Jacobs評(píng)分均低于假手術(shù)組,與假手術(shù)組比較差異顯著(P<0.01)。缺血再灌注組及活血通督湯組脊髓缺血再灌注8h,Jacobs評(píng)分均下降,其
5、中缺血再灌注組下降明顯,兩組比較差異統(tǒng)計(jì)學(xué)意義顯著(P<0.01);脊髓缺血再灌注8h-24h,缺血再灌注組及活血通督湯組后肢運(yùn)動(dòng)功能恢復(fù)緩慢,脊髓缺血再灌注24h,兩組比較有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。隨著脊髓缺血再灌注時(shí)間的延長,在24h-3w,缺血再灌注組后肢運(yùn)動(dòng)功能恢復(fù)不明顯,活血通督湯組后肢運(yùn)動(dòng)功能恢復(fù)明顯,與缺血再灌注組在1w、2w、3w三個(gè)時(shí)間段Jacobs評(píng)分比較有顯著性差異(P<0.01)。
2、c-fo
6、s和c-jun蛋白在假手術(shù)組0.5h、1h、4h、8h四個(gè)時(shí)間點(diǎn)都有輕度表達(dá);在缺血再灌注組和活血通督湯組中0.5h表達(dá)上升,到1h時(shí)均達(dá)到最高峰,之后開始持續(xù)降低。在相同的時(shí)間點(diǎn),缺血再灌注組及活血通督湯組中c-fos和c-jun的表達(dá)量均高于假手術(shù)組,且有顯著性差異(P<0.01);活血通督湯組中四個(gè)時(shí)間點(diǎn)c-fos和c-jun的表達(dá)量均低于缺血再灌注組,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05或P<0.01)。
結(jié)論:
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