間歇性低壓低氧預(yù)處理對真皮下血管網(wǎng)皮片周緣血運建立的研究.pdf

1、目的:觀察間歇性低壓低氧預(yù)處理對SD大鼠帶真皮下血管網(wǎng)皮片周緣血管化進程、細胞增殖以及皮片成活面積的影響。皮膚移植是手外科、燒傷整形科等科室常用治療方法,皮片一般可分為中厚和全厚皮片,而帶真皮下毛細血管網(wǎng)皮片是一種最厚皮片,包含了表皮、真皮和真皮下血管網(wǎng)及其間少許皮下脂肪,因其富含彈力纖維、腺體、毛細血管和少許脂肪,完全存活后較全厚皮片更柔軟、松動而有彈性、耐壓磨、收縮少、感覺功能恢復(fù)較好,且無需二期行去脂修薄術(shù)治療。移植皮片的成活主要

2、是靠皮片與受區(qū)之間盡早建立充分的血運,而血管形成(即組織中新生血管的增殖和形成過程)是建立血運的基礎(chǔ)和關(guān)鍵。帶真皮下血管網(wǎng)移植皮膚血運的建立方式可分為移植皮膚創(chuàng)緣及基底的血管網(wǎng)與受區(qū)血管網(wǎng)建立廣泛的吻合。有實驗表明真皮下血管網(wǎng)皮片邊緣血管的吻接是皮片血運重建的主要途徑,但邊緣建立的血供有限,覆蓋大面積無血管區(qū)時皮片中央會出現(xiàn)壞死。間歇性低壓低氧預(yù)處理(intermittent hypobaric hypoxia precondition

3、ing,IHH-PC)可提高機體多種器官組織對缺血、缺氧及缺血/再灌注損傷等損傷的耐受能力,目前認(rèn)為其保護機制是多因素、多機制參與的過程,已發(fā)現(xiàn)多種調(diào)控基因及其表達物、生長因子及蛋白質(zhì)參與其中,其中包括血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)。血管內(nèi)皮生長因子可特異地作用于血管內(nèi)皮細胞,加速創(chuàng)面的毛細血管化,促進組織內(nèi)毛細血管大量增殖,加速局部血循環(huán)的建立。本實驗旨在觀察間歇性低壓低氧預(yù)處理應(yīng)用于帶真皮下血管網(wǎng)皮片僅靠周緣建立血供時的成活面積和血運

4、的建立情況,為臨床上在無血管區(qū)創(chuàng)面行皮膚移植術(shù)提供實驗依據(jù)和臨床依據(jù)。
　　 方法:
　　 將45只健康SD大鼠(120-150g)隨機分為A、B、C三組。
　　 A組:對照組(Con);
　　 B組:間歇性低壓低氧同處理組(IHH);
　　 C組:間歇性低壓低氧預(yù)處理組(IHH-PC)。
　　 三組大鼠均于背部相對固定位置形成大小分別為1×1cm2、2×2cm2、3×3cm2的帶真皮下血

5、管網(wǎng)皮片。帶真皮下血管網(wǎng)皮片的形成過程如下:逐層切開皮膚、皮下組織,于深筋膜淺面將皮片掀起(包括背部肉膜層,在背部肌膜淺面進行),創(chuàng)面徹底止血,片狀硅膠膜覆蓋創(chuàng)面以阻斷皮片基底的血運建立,將皮片順時針扭轉(zhuǎn)180°,直接原位縫合。間歇性低壓低氧預(yù)處理及間歇性低壓低氧同處理方案:IHH-PC組動物于切取皮片前一周即置于低壓氧艙(河北醫(yī)科大學(xué)生理學(xué)教研室低壓氧實驗室),IHH組動物于切取皮片術(shù)后第一天置于低壓氧艙(河北醫(yī)科大學(xué)生理學(xué)教研室低壓

6、氧實驗室),實驗艙內(nèi)空氣由真空泵逐漸抽出,艙內(nèi)空氣變稀薄,約15分鐘達到相當(dāng)于5000米海拔的大氣環(huán)境(PO2:11.1％),兩組實驗動物每天均處于上述低壓低氧環(huán)境內(nèi)6小時,連續(xù)7天,每天進、出艙時間相對固定,艙溫維持在17～20℃。對照組動物除不接受間歇性低壓低氧處理外,其它條件與低壓低氧動物相同。術(shù)后一周觀察皮片的各項指標(biāo)。
　　 觀察指標(biāo):
　　 1、觀察皮片的顏色、質(zhì)地、彈性等情況。
　　 2、皮片成活面

7、積:皮片形成后1周,數(shù)碼相機記錄圖像分析測量皮片成活部分的最長徑、最寬徑,面積及面積成活百分比。
　　 3、組織學(xué)觀察:于創(chuàng)緣周邊切取組織制成切片,HE染色,光鏡下觀察炎性細胞浸潤、纖維增生、毛細血管形成等組織學(xué)變化,并隨機選取5個視野計算新生血管的數(shù)量,取平均值,進行統(tǒng)計學(xué)分析。
　　 結(jié)果:
　　 大體觀察:45只大白鼠術(shù)后全部喂養(yǎng)成活,以皮片質(zhì)地變硬、失去彈性、顏色變黑為判斷皮片壞死的標(biāo)準(zhǔn),用圖像分析系統(tǒng)測

8、量皮片成活面積。皮片切取范圍1平方厘米的皮片成活面積:A組0.89000cm2,B和C組分別是0.90000、0.91000cm2,三組皮片成活平均寬度、成活面積均無明顯統(tǒng)計學(xué)差異。
　　 切取范圍4平方厘米的皮片成活面積:A組2.53000,B和C組分別是2.9500、3.4900cm2,三組皮片成活平均寬度、成活面積均有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05),組間比較C組高于A、B兩組,B組高于A組;切取范圍9平方厘米的皮片成活面積:A

9、組4.2800,B和C組分別是5.0700、6.0200cm2,三組皮片成活平均寬度、成活面積均有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05),組間比較C組高于A、B兩組,B組高于A組。組織學(xué)觀察:A組:皮膚層次破壞、炎性細胞浸潤明顯,罕見毛細血管存在。B組:皮膚層次較完整,炎性細胞浸潤較多,可見部分保留的血管及少量毛細血管。C組:皮膚層次完整,炎性細胞浸潤較少,真皮層可見較多毛細血管及大管腔血管。上述組織切片在100倍光鏡下,每張切片隨機計算5個視野中

10、毛細血管斷面?zhèn)€數(shù),取平均值。切取范圍1平方厘米的皮片:A組毛細血管的數(shù)量是3.25,B和C組分別是3.15、3.35;切取范圍4平方厘米的皮片:A組毛細血管的數(shù)量是2.81,B和C組分別是3.19、5.03;切取范圍9平方厘米的皮片:A組毛細血管的數(shù)量是2.73,B和C組分別是3.64、5.52。三組皮片新生毛細血管數(shù)量均有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05),C組高于A、B組,B組高于A組。
　　 結(jié)論:
　　 IHH-PC可明