孕酮、干擾素-τ對牛子宮內(nèi)膜細(xì)胞基質(zhì)金屬蛋白酶-2及其抑制劑-2表達(dá)的影響.pdf

1、以處于黃體期的黃牛子宮為材料，用組織塊法和胰蛋白酶消化法在體外培養(yǎng)子宮內(nèi)膜原代細(xì)胞，對這兩種方法進(jìn)行比較，并將細(xì)胞傳代，采用實(shí)時熒光定量PCR研究了孕酮(Progesterone，P)和干擾素-τ(Interferon-τ，IFN-T)對黃牛子宮內(nèi)膜細(xì)胞中基質(zhì)金屬蛋白酶-2(MMP-2)及其組織抑制劑-2(TIMP-2)mRNA表達(dá)的影響。結(jié)果如下： 采用組織塊培養(yǎng)法和胰蛋白酶消化法對子宮內(nèi)膜細(xì)胞進(jìn)行體外培養(yǎng)，均能培養(yǎng)出子宮內(nèi)膜

2、的混合細(xì)胞，組織塊培養(yǎng)法培養(yǎng)的成功率(72.7％)高于胰蛋白酶消化法(33.3％)。傳代后，兩種方法培養(yǎng)出的細(xì)胞生長方式及形態(tài)特點(diǎn)無明顯差異，都以間質(zhì)細(xì)胞為主，可為進(jìn)一步研究胚胎附植提供實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ汀?孕酮和干擾素-τ對黃牛子宮內(nèi)膜細(xì)胞MMP-2和TIMP-2 mRNA的表達(dá)有調(diào)節(jié)作用。孕酮(200nM)對MMP-2mRNA的表達(dá)具有促進(jìn)作用，對TIMP-2 mRNA的表達(dá)具有抑制作用；干擾素-τ(100ng/ml)對MMP-2mR

3、NA的表達(dá)具有促進(jìn)作用，對TIMP-2的表達(dá)有明顯的抑制作用(P>0.05)；同時添加孕酮和干擾素-τ對MMP-2mRAN的表達(dá)的抑制作用，與對照組相比差異不顯著(P>0.05)，對TIMP-2mRAN的表達(dá)有明顯的抑制作用。 孕酮處理組對MMP-2 mRNA的表達(dá)的促進(jìn)作用比干擾素-τ處理組明顯，同時添加孕酮和干擾素-τ對MMP-2 mRNA的表達(dá)有抑制作用；孕酮處理組、干擾素-τ處理組和同時添加孕酮和干擾素-τ的處理組對TI

4、MP-2mRNA的表達(dá)都有抑制作用，但三個處理間組差異不顯著。 比較不同的激素及其培養(yǎng)不同的時間的處理組發(fā)現(xiàn)，添加孕酮培養(yǎng)24h時MMP-2mRNA表達(dá)量最高；同時添加孕酮和干擾素-τ培養(yǎng)6h時TIMP-2mRNA表達(dá)量最低。 MMP-2mRNA相對表達(dá)量與添加孕酮培養(yǎng)的時間存在極顯著正相關(guān)(R<'2>=0.914，P<0.01)；與添加干擾素-τ培養(yǎng)的時間和同時添加孕酮、干擾素.τ共培養(yǎng)的時間有一定的正相關(guān)性，差異顯著