蘋果輪紋病菌對醚菌酯的抗性風(fēng)險評估.pdf

1、蘋果輪紋?。╝pple ring rot）是由蘋果輪紋病菌（Botryosphaeria dothidea）引起的，一直是影響我國蘋果產(chǎn)量的三大病害之一。蘋果輪紋病菌的寄主范圍廣，除蘋果外還危害其他果樹，如梨、葡萄等，高溫多雨地區(qū)發(fā)病嚴(yán)重。蘋果輪紋病在中國各大蘋果主產(chǎn)區(qū)均有發(fā)生，且在蘋果果實儲藏期仍持續(xù)發(fā)病，嚴(yán)重的影響我國蘋果產(chǎn)業(yè)的健康發(fā)展。而在當(dāng)前生產(chǎn)中，使用化學(xué)藥劑仍是防治蘋果輪紋病的主要方法。但由于長期單一使用化學(xué)藥劑防治病害，導(dǎo)

2、致蘋果輪紋病菌對殺菌劑的抗性現(xiàn)象嚴(yán)重，加之存在交互抗性的問題，給蘋果輪紋病的有效控制帶來較大困難。
　　本研究采用菌絲生長速率法，測定了采自山東、遼寧、河北、河南、山西和陜西等地的100株蘋果輪紋病菌對兩種甲氧基丙烯酸酯類殺菌劑醚菌酯和嘧菌酯的敏感性，建立了兩種殺菌劑的敏感基線，對兩種殺菌劑的敏感性進行相關(guān)性分析，并比較了不同省份蘋果輪紋病菌對這兩種殺菌劑的敏感性差異。采用醚菌酯篩選和紫外線誘變相結(jié)合的方法篩選獲得蘋果輪紋病菌抗醚

3、菌酯突變體，并研究其抗性水平、交互抗藥性、抗性穩(wěn)定性、致病力和離體適合度等生物特性，初步評價蘋果輪紋病菌對醚菌酯的抗性風(fēng)險，從而為抗性風(fēng)險管理措施的制定提供依據(jù)。
　　田間蘋果輪紋病菌對兩種殺菌劑的敏感性檢測結(jié)果表明，田間蘋果輪紋病菌對醚菌酯和嘧菌酯均較為敏感，同一種殺菌劑對供試的蘋果輪紋病菌株的EC50值差別不大。嘧菌酯對供試的100個田間蘋果輪紋病菌菌株的EC50值分布在0.5733~1.2978 mg/L，EC50平均值為0

4、.8646±0.0108 mg/L。醚菌酯對供試的100個田間蘋果輪紋病菌菌株的EC50值分布在0.8884~1.6098 mg/L，EC50平均值為1.3032±0.0123 mg/L。Shapiro-Wilk正態(tài)性檢驗結(jié)果表明，所測100株田間蘋果輪紋病菌菌株對嘧菌酯和醚菌酯的敏感性頻率分布均為連續(xù)單峰曲線，且符合連續(xù)的偏正態(tài)分布。因此，EC50平均值0.8646±0.0108 mg/L和1.3032±0.0123 mg/L可以作為

5、田間蘋果輪紋病菌菌絲生長對嘧菌酯和醚菌酯的敏感基線。
　　相關(guān)性分析結(jié)果表明，田間蘋果輪紋病菌對嘧菌酯和醚菌酯的敏感性之間不存在相關(guān)性（r=0.0002，p=0.7509＞0.05）。不同省份蘋果輪紋病菌對同一種殺菌劑的 EC50平均值不存在明顯差異（p＞0.05）。
　　通過紫外誘導(dǎo)的方法獲得孢子懸浮液，并通過紫外誘導(dǎo)和藥劑篩選，共計獲得5株抗醚菌酯蘋果輪紋病菌突變體。抗性水平測定結(jié)果表明，醚菌酯對抗醚菌酯蘋果輪紋病菌突變

6、體的毒力（EC50）分別是52.4392、66.0960、61.7885、62.2381和51.1535 mg/L，分別是親本菌株的55.6倍、69.4倍、64.9倍、65.3倍和53.7倍，屬于中高抗突變體。交互抗性測定結(jié)果表明，與相對敏感菌株相比，5個抗醚菌酯突變體對苯醚甲環(huán)唑、甲基硫菌靈、氟醚菌酰胺和代森聯(lián)的抗性倍數(shù)分別介于0.94-1.38、0.90-1.98、1.17-2.40和0.94-1.19之間，不表現(xiàn)為交互抗性或負(fù)交互

7、抗性，對嘧菌酯的抗性倍數(shù)介于3.67-6.36，表現(xiàn)為存在一定的交互抗性。菌絲生長測定結(jié)果表明，與相對敏感菌株相比，96 h時的抗藥突變體的菌落直徑明顯較小。致病力測定結(jié)果也表明，與相對敏感菌株相比，盡管抗藥突變體的致病力沒有喪失，但在蘋果果實上引起的病斑直徑明顯較小?？剐苑€(wěn)定性研究結(jié)果也表明，將抗藥突變體在無藥培養(yǎng)基上連續(xù)轉(zhuǎn)接培養(yǎng)7代和9代后，其抗性倍數(shù)均明顯降低。以上研究結(jié)果表明，抗醚菌酯蘋果輪紋病菌突變體存在抗性適合下降現(xiàn)象。