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1、課題主要研究石菖蒲及其單體成分槲皮素、乙酸龍腦酯對(duì)細(xì)菌脂多糖(LPS)誘導(dǎo)流產(chǎn)小鼠的保胎作用。 通過免疫組化檢測(cè)子宮組織中CD<,4><'+>/CD<,8><'+>T淋巴細(xì)胞、巨噬細(xì)胞,流式細(xì)胞儀檢測(cè)脾臟協(xié)同刺激分子CD80<'+>/CD86<'+>的表達(dá)以及ELISA方法檢測(cè)子宮勻漿和血清中IL-2、IFN-γ、IL-4、IL-10和孕酮的含量變化,探討石菖蒲及其單體成分的保胎作用及可能的作用機(jī)制,闡明妊娠早期母胎界面的免疫狀
2、態(tài),尋找預(yù)防早期胚胎丟失的措施。試驗(yàn)分為6組,A組為對(duì)照組,B組為L(zhǎng)PS流產(chǎn)模型組,C~E組分別為不同石菖蒲成分藥物預(yù)防組,分別于孕4~7d灌服槲皮素、乙酸龍腦酯、槲皮素+乙酸龍腦酯和石菖蒲煎劑,孕7d尾靜脈注射LPS(0.10μg/鼠),9d剖殺。 結(jié)果表明LPS流產(chǎn)模型組的流產(chǎn)率和胚胎吸收率都達(dá)到100%,具有高CD<,4><'+>T淋巴細(xì)胞和巨噬細(xì)胞及偏向于Th1反應(yīng)的特點(diǎn),適合作為研究藥物保胎作用的流產(chǎn)模型。預(yù)先口服不同
3、石菖蒲成分后,流產(chǎn)率和胚胎吸收率都有不同程度的降低。其中以槲皮素+乙酸龍腦酯合用組的保胎效果最為明顯,流產(chǎn)率和胚胎吸收率分別降至30%和28.6%,與LPS流產(chǎn)模型組差異極顯著,基本達(dá)到正常水平。子宮組織中1111型細(xì)胞因子IFN吖的含量降低,Th2型細(xì)胞因子IL-4和IL-10含量升高,均較LPS流產(chǎn)組差異極顯著;流式細(xì)胞儀檢測(cè)小鼠脾臟CD80<'+>/CD86<'+>的表達(dá),結(jié)果表明,應(yīng)用保胎藥物后能明顯提升因LPS所引起的CD86
4、表達(dá)抑制狀態(tài),協(xié)同刺激Th0細(xì)胞向Th2方向轉(zhuǎn)化,產(chǎn)生有利于妊娠的Th2型細(xì)胞因子;免疫組化結(jié)果表明,應(yīng)用保胎藥物后,子宮組織中CD<,4><'+>T淋巴細(xì)胞和巨噬細(xì)胞的數(shù)量較LPS流產(chǎn)模型組顯著降低,CD<,4><'+>/CD8<'+>比值基本恢復(fù)到正常水平,表明槲皮素和乙酸龍腦酯合用能夠減少子宮中CD<,4><'+>T淋巴細(xì)胞和巨噬細(xì)胞的數(shù)量,對(duì)妊娠的維持起到保護(hù)作用。所以,LPS誘導(dǎo)小鼠流產(chǎn)與母.胎界面免疫平衡失調(diào)有關(guān),中藥石菖蒲
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