2023年全國(guó)碩士研究生考試考研英語(yǔ)一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁(yè)
已閱讀1頁(yè),還剩90頁(yè)未讀 繼續(xù)免費(fèi)閱讀

下載本文檔

版權(quán)說(shuō)明:本文檔由用戶提供并上傳,收益歸屬內(nèi)容提供方,若內(nèi)容存在侵權(quán),請(qǐng)進(jìn)行舉報(bào)或認(rèn)領(lǐng)

文檔簡(jiǎn)介

1、膠質(zhì)瘤是最常見(jiàn)的原發(fā)性腦腫瘤。由于腫瘤侵潤(rùn)性生長(zhǎng),手術(shù)中難以實(shí)現(xiàn)全切除,即使結(jié)合化療、放療綜合治療,預(yù)后依然不佳。尋找膠質(zhì)瘤的預(yù)后指標(biāo)和提高化療、放療效果一直是膠質(zhì)瘤研究的重點(diǎn)。
   早幼粒細(xì)胞白血病(PML)蛋白參與調(diào)控細(xì)胞的生長(zhǎng)、老化、凋亡等各種功能。在許多腫瘤中,PML蛋白都因某種機(jī)制在轉(zhuǎn)錄后被減少甚至完全消除,PML蛋白缺失和某些腫瘤的分級(jí)和進(jìn)展相關(guān)。
   三氧化二砷(ATO)是中藥砒霜的主要成分,通過(guò)其誘導(dǎo)

2、凋亡的作用治療急性早幼粒細(xì)胞白血病獲得良好效果。美國(guó)已經(jīng)開(kāi)始了應(yīng)用ATO治療膠質(zhì)瘤的臨床試驗(yàn),我國(guó)尚未見(jiàn)報(bào)道。
   本課題旨在探討PML蛋白在人腦星形細(xì)胞瘤中的表達(dá)及其對(duì)ATO誘導(dǎo)星形細(xì)胞瘤細(xì)胞凋亡的影響,并探討PML蛋白在ATO對(duì)星形細(xì)胞瘤細(xì)胞作用中的機(jī)制。
   第一部分 PML蛋白在人腦星形細(xì)胞瘤中的表達(dá)
   方法1.收集98例臨床星形細(xì)胞瘤和2例瘤旁正常腦組織石蠟標(biāo)本進(jìn)行免疫組化染色,檢測(cè)PML蛋白表

3、達(dá)的情況。用SPSS10.0進(jìn)行相關(guān)統(tǒng)計(jì)分析。2.采用Western blot檢測(cè)PML蛋白在人星形細(xì)胞瘤細(xì)胞系的表達(dá)。
   結(jié)果1.免疫組化顯示PML蛋白定位在細(xì)胞核,在正常腦組織中表達(dá)高,在星形細(xì)胞瘤組織中表達(dá)降低。I-IV級(jí)星形細(xì)胞瘤的PML蛋白表達(dá)呈逐漸下降趨勢(shì),高級(jí)別星形細(xì)胞瘤的PML蛋白表達(dá)比低級(jí)別星形細(xì)胞瘤的表達(dá)低,但差異不明顯(P=0.057)。2.Western blot顯示PML蛋白在星形細(xì)胞瘤細(xì)胞系中均有

4、表達(dá),蛋白定位在細(xì)胞核,PML蛋白在U87MG中表達(dá)高,在LN444中表達(dá)稍弱,在LN443中表達(dá)最弱。
   結(jié)論1.膠質(zhì)瘤組織中都有PML蛋白表達(dá),表達(dá)量比正常腦組織減少,但無(wú)完全缺失。高級(jí)別星形細(xì)胞瘤比低級(jí)別星形細(xì)胞瘤PML蛋白表達(dá)減少。2.PML蛋白表達(dá)在人膠質(zhì)瘤細(xì)胞U87MG較高,LN444稍低,LN443最低,均定位在細(xì)胞核內(nèi)。
   第二部分三氧化二砷抑制體外人膠質(zhì)瘤細(xì)胞LN444的實(shí)驗(yàn)研究
  

5、方法1.用梯度濃度的ATO處理LN444膠質(zhì)瘤細(xì)胞,CCK-8比色法檢測(cè)細(xì)胞的增殖活性,計(jì)算ATO的細(xì)胞抑制率。2.倒置顯微鏡觀察ATO作用后細(xì)胞的形態(tài)變化。3.Hoechst染色觀察ATO誘導(dǎo)凋亡的作用。4.流式細(xì)胞儀PI染色檢測(cè)ATO作用后的細(xì)胞凋亡率。
   結(jié)果1.ATO對(duì)LN444膠質(zhì)瘤細(xì)胞增殖有明顯的抑制作用,在本實(shí)驗(yàn)范圍內(nèi),呈劑量依賴性和時(shí)間依賴性。2.ATO作用后細(xì)胞出現(xiàn)細(xì)胞質(zhì)濃縮、胞膜破裂、胞質(zhì)內(nèi)容物外溢等現(xiàn)象

6、。3.Hoechst染色顯示用藥后細(xì)胞出現(xiàn)細(xì)胞核體積縮小,不規(guī)則樣變,呈現(xiàn)致密濃染強(qiáng)熒光,隨著藥物濃度增加,出現(xiàn)核碎裂及凋亡小體等典型變化。4.PI染色顯示ATO處理后細(xì)胞凋亡顯著增加,呈劑量依賴性和時(shí)間依賴性。
   結(jié)論1.ATO對(duì)LN444膠質(zhì)瘤細(xì)胞有明顯的增殖抑制作用,抑制作用呈劑量依賴性和時(shí)間依賴性。2.ATO對(duì)LN444膠質(zhì)瘤細(xì)胞有誘導(dǎo)凋亡的作用
   第三部分下調(diào)PML蛋白表達(dá)對(duì)ATO誘導(dǎo)LN444細(xì)胞凋亡

7、的影響及機(jī)制的研究
   方法1.CCK-8比色法檢測(cè)ATO處理后U87MG、LN444和LN443的增殖活性,計(jì)算ATO對(duì)三種細(xì)胞的細(xì)胞抑制率。2.用熒光顯微鏡檢測(cè)PML特異的siRNA轉(zhuǎn)染LN444的效率,并用Western blot檢驗(yàn)干擾PML蛋白表達(dá)的效果。3.CCK-8法檢測(cè)ATO處理后對(duì)照組(轉(zhuǎn)染無(wú)義siRNA)和轉(zhuǎn)染組(轉(zhuǎn)染PML siRNA)的細(xì)胞活性,計(jì)算ATO對(duì)兩組細(xì)胞的細(xì)胞抑制率。4.用流式細(xì)胞儀Anne

8、xin V/PI雙染檢測(cè)ATO對(duì)照組和轉(zhuǎn)染組細(xì)胞的凋亡誘導(dǎo)作用。5.用Western blot檢測(cè)ATO處理后對(duì)照組和轉(zhuǎn)染組細(xì)胞中的p53及acetyl-p53蛋白表達(dá)。
   結(jié)果1.ATO對(duì)U87MG的抑制作用最強(qiáng),對(duì)LN444的抑制作用稍弱,對(duì)LN443的抑制作用最弱。2.siRNA的轉(zhuǎn)染效率>85%,轉(zhuǎn)染后PML蛋白表達(dá)顯著低于對(duì)照組,siRNA l的抑制效果最高。3.ATO對(duì)PML蛋白表達(dá)F調(diào)的LN444轉(zhuǎn)染細(xì)胞增殖抑

9、制作用減弱。4.ATO對(duì)PML蛋白表達(dá)下調(diào)的LN444轉(zhuǎn)染細(xì)胞誘導(dǎo)凋亡作用減弱。5.對(duì)照組和轉(zhuǎn)染組細(xì)胞均見(jiàn)p53和acetyl-p53表達(dá)。用藥后p53和acetyl-p53表達(dá)均隨時(shí)間下降。對(duì)照組p53下降快,acetyl-p53下降慢。轉(zhuǎn)染組p53下降慢,acetyl-p53下降快。
   結(jié)論1.ATO在LN444中能激活p53非依賴途徑誘導(dǎo)凋亡。2.ATO調(diào)節(jié)PML蛋白介導(dǎo)的p53降解,不影響PML蛋白介導(dǎo)的p53乙?;?/p>

溫馨提示

  • 1. 本站所有資源如無(wú)特殊說(shuō)明,都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請(qǐng)下載最新的WinRAR軟件解壓。
  • 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等,如果需要附件,請(qǐng)聯(lián)系上傳者。文件的所有權(quán)益歸上傳用戶所有。
  • 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙,網(wǎng)頁(yè)內(nèi)容里面會(huì)有圖紙預(yù)覽,若沒(méi)有圖紙預(yù)覽就沒(méi)有圖紙。
  • 4. 未經(jīng)權(quán)益所有人同意不得將文件中的內(nèi)容挪作商業(yè)或盈利用途。
  • 5. 眾賞文庫(kù)僅提供信息存儲(chǔ)空間,僅對(duì)用戶上傳內(nèi)容的表現(xiàn)方式做保護(hù)處理,對(duì)用戶上傳分享的文檔內(nèi)容本身不做任何修改或編輯,并不能對(duì)任何下載內(nèi)容負(fù)責(zé)。
  • 6. 下載文件中如有侵權(quán)或不適當(dāng)內(nèi)容,請(qǐng)與我們聯(lián)系,我們立即糾正。
  • 7. 本站不保證下載資源的準(zhǔn)確性、安全性和完整性, 同時(shí)也不承擔(dān)用戶因使用這些下載資源對(duì)自己和他人造成任何形式的傷害或損失。

評(píng)論

0/150

提交評(píng)論