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文檔簡介
1、 目的:
以一系列同一親本來源對氟康唑敏感性不同的白念珠菌為對象,研究其菌絲相與酵母相ERG11基因序列及分泌性酸性蛋白酶活性之間的差異,從而為白念珠菌病原真菌學和臨床檢驗學中,究竟是選擇白念珠菌的菌絲相還是酵母相為研究對象提供理論依據(jù)。
方法:
對12株分離自同一HIV陽性者的白念珠菌分別進行菌絲相與酵母相培養(yǎng)后,抽提基因組DNA,PCR擴增ERG11基因(包括部分上游和下游非編碼區(qū)),PCR產(chǎn)物用Ac
2、c Ⅰ和Mun Ⅰ消化,消化產(chǎn)物進行瓊脂糖凝膠電泳(PCR-RFLP);選擇其中5株白念珠菌,用下游引物對部分ERG11基因進行測序,比較兩相細胞ERG11基因序列差異;用牛血清白蛋白培養(yǎng)基測定8株白念珠菌菌絲相與酵母相分泌性酸性蛋白酶的活性。
結(jié)果:
1.CA-7、CA-14,CA-16和CA-17的菌絲相與酵母相ERG11基因酶切圖譜存在差異;
2.CA-7菌絲相與酵母相ERG11基因第1547位點、1
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