紅棗中環(huán)磷酸腺苷提取與純化工藝研究.pdf

1、本研究以新疆紅棗為試驗(yàn)材料,研究的主要內(nèi)容為:建立一套快速、準(zhǔn)確、靈敏的分析紅棗中cAMP的UPLC方法;超聲波輔助高效提取cAMP方法研究;提取物高效酶解與cAMP釋放技術(shù)研究;cAMP分離純化工藝方法的研究。結(jié)果如下:
　　1.大棗環(huán)磷酸腺苷(cAMP)超高效液相色譜(UPLC)的色譜條件為:色譜柱:pH2-11,ZORBAX Extend C182.1×100mm1.8-Micron Rapid Resolution HD2

2、.1×100mm1.8-Micron,流動(dòng)相:V(甲醇):V(0.1mol/L磷酸二氫鉀)=20:80;流速1.0mL/min,柱溫25℃,進(jìn)樣量10uL,最佳檢測波長258nm。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明:標(biāo)準(zhǔn)曲線線性良好,加標(biāo)回收率為100.24％,標(biāo)準(zhǔn)偏差為0.92%。該方法簡便、靈敏,重現(xiàn)性好,能夠快速測定大棗中cAMP的含量。
　　2.建立一種基于超聲波輔助提取紅棗中環(huán)磷酸腺苷(cAMP)的方法。以料液比、超聲波功率、處理時(shí)間、超聲處

3、理方式為提取參數(shù),按照單因素實(shí)驗(yàn)確定參數(shù)變化水平區(qū)間,cAMP提取率為響應(yīng)值,采用中心組合設(shè)計(jì)的響應(yīng)面分析法優(yōu)化參數(shù),結(jié)果表明,cAMP最佳提取工藝參數(shù)為:料液比1:15.5、超聲波功率314W、處理時(shí)間11.7min、超聲處理方式1.08min,cAMP提取量為502.2ug/g,提取率為96.80%。
　　3.大棗提取液中多糖的存在對(duì)cAMP提取率存在較大的影響。通過果膠酶的水解作用,在120min附近c(diǎn)AMP提取率達(dá)到峰值,

4、pH變化區(qū)間為pH4.24-pH4.18,呈弱酸性穩(wěn)定環(huán)境。
　　4.利用 AB-8型大孔吸附樹脂除去大棗提取液中色素、多糖等雜質(zhì),優(yōu)化參數(shù)為:上樣液最佳pH4、濃度為20ug/mL、上樣流速為2mL/min,上樣液最大體積為300mL;采用40%乙醇溶液作為洗脫劑,洗脫劑流速2mL/min,洗脫劑最大用量為160mL,收集洗脫液接近為無色。
　　5.利用D-290型大孔吸附樹脂對(duì)cAMP進(jìn)行分離純化。試驗(yàn)中選取上樣液濃度、