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1、目的:在該實驗中我們通過建立大鼠異基因骨髓移植模型,探討移植時移植物內(nèi)T細胞和經(jīng)預(yù)處理后受體殘存T細胞的不同比例對GVHD的嚴(yán)重程度的影響.方法:選擇清潔級遠交群雄性SD大鼠為受鼠,從移植前6天起接受TBI2Gy,每日2次,間隔4小時,持續(xù)3天,移植前3天起每日腹腔注射環(huán)磷酰胺(cyclophosphamide,CTX)60mg/kg,持續(xù)2天.將受體大鼠隨機分為AaBbCc6組,ABC為實驗組,abc為對照組,每組均為10只.控制A組
2、移植物內(nèi)T細胞與受體T細胞比例為1:1,B組為2:1,C組為4:1.移植當(dāng)天將ABC實驗組分別剪尾取血查外周血有核細胞記數(shù)和CD3+細胞比例,計算受體體內(nèi)CD3+細胞絕對值.選擇近交系雌性WISTAR大鼠為供鼠.移植當(dāng)天處死供體大鼠,收集混合供體骨髓細胞,調(diào)整細胞濃度,取樣查CD3+細胞比例.室溫放置備用.移植時分別按上述比例經(jīng)尾靜脈回輸供體細胞.abc組分別回輸與相應(yīng)實驗組等量的滅菌生理鹽水.移植后每三天稱重一次,觀察生存期、有無腹瀉
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