肥大細(xì)胞及干細(xì)胞因子與慢性腎小球腎炎腎間質(zhì)纖維化的相關(guān)研究.pdf

1、第一部分腎組織肥大細(xì)胞的檢測方法探討及形態(tài)特點(diǎn)觀察;目的:探索檢測腎組織肥大細(xì)胞的理想方法,研究腎組織中肥大細(xì)胞的分布和形態(tài)特點(diǎn).方法用免疫組織化學(xué)方法和4種不同PH值的甲苯胺藍(lán)染液對(duì)46例腎小球腎炎患者腎活檢標(biāo)本進(jìn)行染色,觀察肥大細(xì)胞在不同時(shí)間點(diǎn)的檢出數(shù)及分布、形態(tài)特點(diǎn),比較幾種方法肥大細(xì)胞的檢出數(shù),并與免疫組織化學(xué)結(jié)果對(duì)照,計(jì)算每種染液的檢出率.用透射電鏡進(jìn)一步觀察肥大細(xì)胞的形態(tài)及超微結(jié)構(gòu).第二部分肥大細(xì)胞與慢性腎小球腎炎腎間質(zhì)纖維

2、化的關(guān)系研究;目的:探討肥大細(xì)胞(Mast cell,MC)在腎組織中的浸潤與腎間質(zhì)纖維化、轉(zhuǎn)化生長因子1(transforming growth factor beta 1,TGF-β1)、α-平滑肌肌動(dòng)蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)表達(dá)及腎功能之間的關(guān)系.同時(shí)探尋肥大細(xì)胞致腎間質(zhì)纖維化的可能因素.方法收集46例慢性腎小球腎炎患者的臨床資料和腎活檢標(biāo)本,采用免疫組織化學(xué)技術(shù)檢測肥大細(xì)胞在腎組織中的浸潤及

3、α-SMA、TGF-β1的表達(dá),并分析它們之間及其與腎間質(zhì)纖維化、腎功能間的相關(guān)性.第三部分干細(xì)胞因子在腎組織中的表達(dá)及其與肥大細(xì)胞的關(guān)系—肥大細(xì)胞在腎間質(zhì)中浸潤原因的初步探討;目的:探討干細(xì)胞因子(stem cell factor,SCF)在腎組織中的表達(dá)及其與肥大細(xì)胞的關(guān)系.方法采用原位雜交和免疫組織化學(xué)技術(shù),分別在基因和蛋白質(zhì)水平檢測5例正常腎組織和46例慢性腎小球腎炎患者腎組織中的SCF的表達(dá),同時(shí)觀察其受體c-kit(CD11

4、7)、轉(zhuǎn)化生長因子β1(transforming growth factor beta 1,TGF-β1)、α—平滑肌肌動(dòng)蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)的表達(dá)變化及肥大細(xì)胞、巨噬細(xì)胞的浸潤情況.第四部分TGF-β1誘導(dǎo)人近曲腎小管上皮細(xì)胞表達(dá)干細(xì)胞因子;目的:研究轉(zhuǎn)化生長因子(TGF-β<,1>)對(duì)人近曲腎小管上皮細(xì)胞(HKC)表達(dá)干細(xì)胞生長因子(SCF)的影響.方法以HKC細(xì)胞為研究對(duì)象,采用細(xì)胞原位雜