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1、幾丁質(zhì)合成影響蝗綠僵菌毒力的機(jī)制重慶大學(xué)碩士學(xué)位論文(學(xué)術(shù)學(xué)位)學(xué)生姓名:張俊杰指導(dǎo)教師:金凱教授專(zhuān)業(yè):生物學(xué)學(xué)科門(mén)類(lèi):理學(xué)重慶大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院二O一七年四月國(guó)家自然科學(xué)基金面上項(xiàng)目:幾丁質(zhì)合成對(duì)綠僵菌侵染致病的作用機(jī)制(項(xiàng)目編號(hào):31471820,2015.12018.12)。重慶大學(xué)碩士學(xué)位論文中文摘要I摘要蝗綠僵菌是研究比較廣泛的昆蟲(chóng)病原真菌,闡明其侵染致病的分子機(jī)制十分必要。幾丁質(zhì)是細(xì)胞壁的重要成分,影響真菌的生長(zhǎng)與毒力。合成幾
2、丁質(zhì)的關(guān)鍵酶是幾丁質(zhì)合成酶。目前,對(duì)于幾丁質(zhì)合成影響毒力的機(jī)制在昆蟲(chóng)病原真菌并沒(méi)有報(bào)道。本文以昆蟲(chóng)病原真菌的模式生物蝗綠僵菌為研究對(duì)象,闡明幾丁質(zhì)合成影響蝗綠僵菌毒力的機(jī)制。本文的研究結(jié)果如下:1.MaChsIII、MaChsV、MaChsVII影響蝗綠僵菌毒力。MaChsI、MaChsII、MaChsIV、MaChsVI并不影響綠僵菌的毒力。ΔMaChsIII、ΔMaChsV點(diǎn)滴毒力降低。有意思的是,ΔMaChsV注射毒力增強(qiáng)。與其它
3、敲除菌株不一樣的是,ΔMaChsVII點(diǎn)滴毒力基本喪失,注射毒力極大的降低。2.ΔMaChsIII、ΔMaChsV、ΔMaChsVII在東亞飛蝗體表附著階段有缺陷。ΔMaChsIII、ΔMaChsV、ΔMaChsVII疏水性降低,三個(gè)敲除菌株的疏水性只有野生型的25%左右。3.ΔMaChsIII、ΔMaChsV、ΔMaChsVII在體壁穿透階段有缺陷。ΔMaChsIII與ΔMaChsVII在東亞飛蝗后翅上的萌發(fā)減慢,ΔMaChsV在東亞
4、飛蝗后翅上的萌發(fā)加快。ΔMaChsIII、ΔMaChsV、ΔMaChsVII在附著胞形成階段有缺陷,并且ΔMaChsV、ΔMaChsVII敲除菌株形成的附著胞在形態(tài)上與WT有很大的差異。4.MaChsIII、MaChsV、MaChsVII敲除以后,蝗綠僵菌更加容易被東亞飛蝗識(shí)別。5.MaChsIII、MaChsV、MaChsVII三個(gè)基因?qū)τ诨染G僵菌細(xì)胞壁的完整性是必須的,敲除這三個(gè)基因以后,蝗綠僵菌細(xì)胞壁變得很脆弱。6.幾丁質(zhì)合成酶家
5、族成員影響蝗綠僵菌細(xì)胞壁的成分。MaChsI、MaChsII、MaChsIV不影響蝗綠僵菌細(xì)胞壁的成分。與WT相比,ΔMaChsVI細(xì)胞壁中幾丁質(zhì)成分降低了37%,ΔMaChsV和ΔMaChsVII細(xì)胞壁中的幾丁質(zhì)與β13葡聚糖含量顯著增高。ΔMaChsV細(xì)胞壁中的甘露糖蛋白含量降低了10%,而在ΔMaChsIII中,甘露糖蛋白的含量增加了20%。幾丁質(zhì)合成影響蝗綠僵菌的毒力,MaChsIII、MaChsV、MaChsVII三個(gè)基因敲除
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