含N化合物的合成、表征及與DNA作用機(jī)理的電化學(xué)研究.pdf

1、本淪文合成了系列含氮的化合物及金屬配合物，通過元素分析、紅外光譜及X-射線衍射分析測(cè)定其結(jié)構(gòu)。利用電化學(xué)和光譜的方法研究了這些化合物與DNA的作用機(jī)理，確定了最佳反應(yīng)條件。運(yùn)用核酸雜交技術(shù)，用具有電化學(xué)活性的化合物作為指示劑制備了DNA電化學(xué)傳感器，用于識(shí)別和測(cè)定互補(bǔ)的DNA版斷。對(duì)電極表面進(jìn)行修飾，制備成DNA探針，并將DNA探針應(yīng)用于靶序列DNA片斷的識(shí)別。能有效的識(shí)別互補(bǔ)的ssDNA片斷，具有良好的選擇性，可用于實(shí)際樣品的分析。

2、 (1)以鄰苯二胺為原料，合成了三個(gè)苯并咪唑類化合物并與過渡金屬配位，用元素分析、紅外光譜對(duì)產(chǎn)物進(jìn)行了表征。其中兩個(gè)化合物培養(yǎng)出了單晶，并用X-射線衍射分析確定了晶體結(jié)構(gòu)，化合物4a為正交晶系，4b為單斜晶系。配合物[Cd(C<,7>H<,6>N<,2>)<,2>]<'2+>在玻碳電極上發(fā)生準(zhǔn)可逆反應(yīng)。[Cd(C<,7>H<,6>N<,2>)<,2>]<'2+>在0.2 mol·L<'-1>的AcOH-AcONa緩沖溶液中，運(yùn)用循

3、環(huán)伏安法及微分脈沖伏安法研究了[Cd(C<,7>H<,6>N<,2>)<,2>]<'2+>與鮭魚精DNA的相互作用，結(jié)果表明[Cd(C<,7>H<,6>N<,2>)<,2>]<'2+>通過嵌插作用與DNA結(jié)合。 (2)合成了雙水楊醛縮乙二胺銅配合物[Cu(C<,16>H<,14>N<,2>O<,2>)]，用元素分析、紅外光譜進(jìn)行表征，確定其結(jié)構(gòu)。在0.2 mol·L<'-2>pH 4.40 B-R緩沖溶液中，運(yùn)用循環(huán)伏安法及微分

4、脈沖伏安法研究了[Cu(C<,16>H<,14>N<,2>O<,2>)]與鮭魚精DNA的相互作用。[Cu(C<,16>H<,14>N<,2>O<,2>)]在玻碳電極上的循環(huán)伏安圖出現(xiàn)一氧化峰。[Cu(C<,16>H<,14>N<,2>O<,2>)]與DNA作用后，氧化峰電流減小，氧化峰電位幾乎不發(fā)生變化。結(jié)果表明，[Cu(C<,16>H<,14>N<,2>O<,2>)]與DNA結(jié)合比為2：1，結(jié)合常數(shù)為6.63×10<'5>L<'2>·

5、mol<'-2>。 (3)以鄰氨基酚為底物，通過OAP-H<,2>O<,2>-HRP體系模擬OAP在人血紅細(xì)胞中的代謝作用，通過酶促反應(yīng)制得3-氨基酚嗯嗪純品。采用各種電化學(xué)方法研究了AP在玻碳電極上的電化學(xué)行為及其與魚精DNA間的相互作用，并以AP為雜交指示劑，用共價(jià)鍵合法制備了DNA生物傳感器。同時(shí)討論了掃速、雜交時(shí)間等對(duì)DNA生物傳感器的影響。測(cè)定了DNA電化學(xué)傳感器檢測(cè)乙肝病毒的檢測(cè)線性范圍為3.53×10<'-7>～1

6、.08×10<'-6>mol·L<'-1>，在此濃度范圍內(nèi)的DNA可定量測(cè)檢測(cè);檢測(cè)限為7.0×10<'-8>mol·L<'-1>(S/N=3)。 (4)合成了鄰菲咯啉銅(Ⅱ)配合物[Cu(H<,2>O)(phen)<,2>]·2ClO<,4>(phen=鄰菲咯啉)，通過元素分析和紅外光譜對(duì)其進(jìn)行了表征。在0.2 mol·L<'-1>的B-R緩沖溶液中，運(yùn)用電化學(xué)法、紫外-可見光譜法和熒光分析法研究了[Cu(H<,2>O)(ph

7、en)<'2+>與鮭魚精DNA的相互作用。結(jié)果表明[Cu(H<,2>O)(phen)<,2>]<'2+>通過嵌插作用與DNA結(jié)合，實(shí)驗(yàn)求得結(jié)合反應(yīng)的結(jié)合比為1：1，結(jié)合常數(shù)為1.34×10<'5>L·mol<'-1>。通過對(duì)裸玻碳電極，ssDNA/GCE，dsDNA/GCE分別在嵌合指示劑后微分脈沖伏安行為的比較，說明指示劑有良好的選擇性。以[Cu(H<,2>O)(phen)<,2>]．2ClO<,4>作為雜交指示劑，通過共價(jià)鍵合法進(jìn)一

8、步制備成DNA生物傳感器。測(cè)定了DNA電化學(xué)傳感器檢測(cè)人免疫缺陷病毒(HIV)的檢測(cè)線性范圍為3.1×10<'9>～7.8×10<'-11>mol·L<'-1>，在此濃度范圍內(nèi)的DNA可定量檢測(cè)；檢測(cè)限為1.3×10<'-11>mol·L<'-1>(S/N=3)。能有效的識(shí)別互補(bǔ)的ssDNA片斷，具有良好的選擇性，可用于實(shí)際樣品的分析。 (5)合成了鄰菲咯啉銅( Ⅱ)配合物[Cu(dmp)(H<,2>O)Cl<,2>](dmp=

9、2,9-二甲基-1。10-鄰菲咯啉)，通過元素分析、紅外光譜及X-射線衍射分析對(duì)其進(jìn)行了表征。Cu(dmp)(H<,2>O)Cl<,2>]分子的大小與dsDNA小溝的尺寸相符合，有利于[Cu(dmp)(H<,2>O)Cl<,2>]分子與dsDNA發(fā)生嵌插作用。運(yùn)用循環(huán)伏安法及微分脈沖伏安法研究了[Cu(dmp)(H<,2>O)Cl<,2>]在玻碳電極上的電化學(xué)行為及其與魚精DNA間的相互作用，并以[Cu(dmp)(H<,2>O)Cl<,

10、2>]為雜交指示劑，用共價(jià)鍵合法制備了DNA生物傳感器，同時(shí)討論了掃速、離子強(qiáng)度等對(duì)DNA生物傳感器的影響。測(cè)定了DNA電化學(xué)傳感器檢測(cè)乙肝病毒的檢測(cè)線性范圍為8.82×10<'-8>～8.82×10<'-7>mol·L<'-1>，在此濃度范圍內(nèi)的DNA可定量測(cè)定；檢測(cè)限為7.0×10<'-8>mol·L<'-1>(S/N=3)。希望為設(shè)計(jì)合成具有應(yīng)用前景的高效低毒、抗菌、抗腫瘤藥物提供一定的科學(xué)研究基礎(chǔ)及理論依據(jù)。 (6)合成

11、了鄰菲咯啉鈷(Ⅱ)配合物[Co(phen)<,2>IP]·2ClO<,4>·3H<,2>O(phen=鄰菲咯啉，IP=咪唑并[4，5-f]鄰菲咯啉)，通過元素分析和紅外光譜對(duì)其進(jìn)行了表征。運(yùn)用電化學(xué)法、紫外-可見光譜法和熒光分析法研究了[Co(phen)<,2>IP]<'2+>與鮭魚精DNA的相互作用。結(jié)果表明[Co(phen)<,2>IP]<'2+>通過嵌插作用與DNA結(jié)合，實(shí)驗(yàn)求得結(jié)合反應(yīng)的結(jié)合比為1：1，結(jié)合常數(shù)為3.74×10<