早產(chǎn)兒腦損傷外周血NK細(xì)胞與T細(xì)胞亞群變化研究.pdf

1、腦損傷是早產(chǎn)兒常見的嚴(yán)重并發(fā)癥，常表現(xiàn)為不同程度的腦缺血性或/和出血性損傷，其發(fā)病機(jī)制復(fù)雜，涉及缺氧缺血后再灌注損傷、腦血流動(dòng)力學(xué)調(diào)節(jié)紊亂及感染后免疫應(yīng)答導(dǎo)致的各種炎癥反應(yīng)等。早產(chǎn)兒屬高危新生兒人群，更易受到圍生期各種環(huán)境因素及不良事件的影響。窒息缺氧和感染是導(dǎo)致早產(chǎn)兒腦損傷的首要原因，二者作為應(yīng)激原，可通過介導(dǎo)多種炎癥反應(yīng)，致使機(jī)體發(fā)生一系列病理生理變化。研究表明機(jī)體的神經(jīng)、內(nèi)分泌與免疫系統(tǒng)構(gòu)成網(wǎng)絡(luò)共同調(diào)節(jié)并維持機(jī)體內(nèi)環(huán)境穩(wěn)定。免疫系

2、統(tǒng)參與腦損傷的發(fā)病過程，而免疫失衡與炎癥反應(yīng)是形成腦損傷的中間環(huán)節(jié)。國(guó)外有人采用免疫抑制劑FTY720阻止T細(xì)胞滲透入腦組織可減輕缺血再灌注損傷，且諸多有關(guān)新生兒缺氧缺血性腦病免疫學(xué)機(jī)制研究也證實(shí)了免疫失調(diào)參與腦損傷的發(fā)生發(fā)展。其中，細(xì)胞免疫發(fā)揮著關(guān)鍵作用，免疫細(xì)胞可通過釋放各種細(xì)胞因子誘發(fā)新生兒腦損傷。有關(guān)NK細(xì)胞及T淋巴細(xì)胞亞群在新生兒缺氧缺血性腦病免疫學(xué)發(fā)病中作用的研究較多，也較明確;但目前仍缺乏早產(chǎn)兒腦損傷免疫學(xué)機(jī)制相關(guān)研究。因

3、此，本研究旨在探討早產(chǎn)兒腦損傷患兒機(jī)體內(nèi)是否也存在著免疫失衡。
　　目的:
　　研究NK細(xì)胞及T淋巴細(xì)胞亞群在早產(chǎn)兒腦損傷患兒外周血中的表達(dá)，以期探討NK細(xì)胞及T淋巴細(xì)胞亞群在早產(chǎn)兒腦損傷發(fā)病過程中的作用及其在診斷中的價(jià)值，為早產(chǎn)兒腦損傷早期診斷和治療靶點(diǎn)的選擇提供依據(jù)。
　　材料和方法:
　　隨機(jī)選取2013年3月至2013年12月鄭州大學(xué)第三附屬醫(yī)院（河南省婦幼保健院）收治的早產(chǎn)兒106例，其中男54例，女5

4、2例，男女比例為1.04/1;胎齡28～36+6周，平均32.36±3.35周;出生體質(zhì)量(BW)700～3300g，平均1920.86±591.29g。入選標(biāo)準(zhǔn):(1)28≤胎齡(GA)＜37周;(2)出生2h以內(nèi);(3)獲得父母知情同意。排除標(biāo)準(zhǔn):(1)由遺傳代謝紊亂、新生兒感染、低血糖、高膽紅素血癥等引起的腦損傷;(2)母親合并自身免疫性疾病及可能對(duì)新生兒免疫系統(tǒng)產(chǎn)生影響的相關(guān)疾病;(3)新生兒出生前后接觸影響免疫功能的藥物。

5、r>　　納入研究對(duì)象的患兒于生后2h內(nèi)留取外周靜脈血2ml，采用流式細(xì)胞儀檢測(cè)外周血NK細(xì)胞及T淋巴細(xì)胞亞群;NK細(xì)胞的表達(dá)以表型CD3-CD16+CD56+表示，T淋巴細(xì)胞亞群表達(dá)以其細(xì)胞免疫表型CD3+、CD4+、CD8+表示，計(jì)算各免疫細(xì)胞百分比及CD4+/CD8+比值，并對(duì)各組數(shù)據(jù)進(jìn)行比較分析，以此來了解腦損傷早產(chǎn)兒的細(xì)胞免疫狀態(tài)。
　　將納入研究對(duì)象的106例早產(chǎn)兒分別按胎齡(GA)(28周≤GA＜32周45例，GA≥3

6、2周61例);出生體質(zhì)量(BW)（BW＜1500g42例，BW≥1500g64例）;依據(jù)生后Apgar評(píng)分判斷有無窒息（窒息組38例，無窒息組68例）進(jìn)行分組比較外周血NK及T淋巴細(xì)胞亞群的表達(dá)。進(jìn)一步完善頭顱超聲、MRI、振幅整合腦電圖等檢查，結(jié)合臨床表現(xiàn)，參照第八版《兒科學(xué)》、第四版《實(shí)用新生兒學(xué)》、《早產(chǎn)兒腦損傷診斷與防治專家共識(shí)》判斷是否存在腦損傷。排除中途放棄治療或死亡、資料不完整的病例36例，共計(jì)有70例病例納入下一步研究，

7、按照是否存在腦損傷分為腦損傷組（46例）與對(duì)照組（無腦損傷組，24例）;比較兩組患兒外周血NK及T淋巴細(xì)胞亞群的表達(dá)。
　　結(jié)果:
　　1.GA＜32周組早產(chǎn)兒外周血CD3+、CD4+、CD8+、CD3-CD16+CD56+表達(dá)水平及CD4+/CD8+比值低于GA≥32周組早產(chǎn)兒，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。
　　2.BW＜1500g組早產(chǎn)兒外周血CD3+、CD4+、CD8+、CD3-CD16+CD56+水平及

8、CD4+/CD8+比值低于BW≥1500g組早產(chǎn)兒，除CD8+差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)，各項(xiàng)指標(biāo)差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。
　　3.窒息早產(chǎn)兒外周血CD3+、CD4+、CD3-CD16+CD56+表達(dá)水平及CD4+/CD8+比值低于無窒息組，其中，CD8+高于無窒息組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。
　　4.腦損傷早產(chǎn)兒外周血CD3+、CD4+、CD3-CD16+CD56+表達(dá)水平及CD4+/CD8+