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1、目的:觀察32周以下早產(chǎn)兒不同濃度氧暴露后,外周血單個(gè)核細(xì)胞(PBMC)內(nèi)活性氧簇產(chǎn)生與自噬水平,探討活性氧簇產(chǎn)生與自噬變化的關(guān)系。
方法:選擇胎齡為32周以下診斷為呼吸衰竭(Ⅰ型呼衰:PO2<50mmHg;Ⅱ型呼衰:PO2<50 mmHg,PCO2>50 mmHg)需給氧支持治療的早產(chǎn)兒30例作為氧暴露組。根據(jù)吸氧濃度不同分為3組,其中低濃度吸氧組10例,吸氧濃度<30%;中濃度吸氧組10例,吸氧濃度(30~40)%;高濃度
2、吸氧組10例,吸氧濃度>40%;氧暴露組中男17例,女13例。胎齡28~32周,質(zhì)量(1250±156)g。同期選擇10例32周以下無(wú)其他疾病且未吸氧的早產(chǎn)兒作為對(duì)照組,其中男5例,女5例。胎齡30~32周,質(zhì)量(1328±109)g。氧暴露組與對(duì)照組患兒胎齡、出生體質(zhì)量比較差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。該實(shí)驗(yàn)通過(guò)四川醫(yī)科大學(xué)附屬醫(yī)院倫理委員會(huì)的批準(zhǔn),所有患兒進(jìn)行實(shí)驗(yàn)前均征得家屬同意并簽署知情同意書(shū)。各組氧療48小后,與對(duì)照組中同期未吸氧的32周
3、以下早產(chǎn)兒,經(jīng)橈動(dòng)脈采血3ml,分離外周血單個(gè)核細(xì)胞(PBMCs)及血清標(biāo)本用于檢測(cè),采用Mitosox Red標(biāo)記結(jié)合激光共聚焦顯微鏡觀察檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)活性氧簇(ROS)的生成量、丹(磺)酰戊二胺(MDC)結(jié)合激光共聚焦顯微鏡觀察自噬表達(dá)水平、硫代巴比妥酸比色法檢測(cè)血清中丙二醛(MDA)含量。
結(jié)果:早產(chǎn)兒氧暴露后,隨著使用氧濃度的升高,外周血單個(gè)核細(xì)胞(PBMC)內(nèi)活性氧簇(ROS)、自噬體表達(dá)、血清丙二醛(MDA)含量均逐漸
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