蜆殼花椒果皮有效成分篩選及活性研究.pdf

1、蜆殼花椒(ZanthoxylumdissitumHemsl.)屬蕓香科花椒屬攀援藤本植物，根、莖及葉均可人藥，臨床上有祛風(fēng)活絡(luò)、散瘀止痛、解毒消腫之功效，民間用于治療腰腿疼痛、關(guān)節(jié)疼痛、跌打損傷等癥，為了更好地開(kāi)發(fā)和利用我國(guó)蜆殼花椒植物資源，本文對(duì)甘肅省隴南產(chǎn)的蜆殼花椒果皮多糖抗腫瘤活性進(jìn)行了研究。
　　 首先對(duì)蜆殼花椒果皮化學(xué)成分進(jìn)行了預(yù)實(shí)驗(yàn)，分別采用不同試劑和薄層層析法進(jìn)行試驗(yàn)，結(jié)果表明其中含有生物堿、皂苷、黃酮及其苷、強(qiáng)心

2、苷、蒽醌及其苷、糖及其苷、揮發(fā)油、油脂、有機(jī)酸、氨基酸、蛋白質(zhì)，不含鞣質(zhì)和酚類(lèi)、香豆素、萜類(lèi)內(nèi)酯化合物、甾體及萜類(lèi)化合物。
　　 其次對(duì)蜆殼花椒果皮總多糖、總生物堿和總皂苷的生物學(xué)活性進(jìn)行了初步研究：(1)采用濾紙圓片法研究了它們對(duì)4種供試細(xì)菌株(肺炎克雷伯菌、乳房鏈球菌、金黃色葡萄球菌、大腸桿菌)的抑制活性，結(jié)果表明，蜆殼花椒果皮總皂苷對(duì)四種供試菌均無(wú)抑制作用；總多糖在濃度為10mg/mL時(shí)對(duì)金黃色葡萄球菌和大腸桿菌有抑制作用

3、，總生物堿在濃度為10mg/mL時(shí)對(duì)四種供試菌均有不同程度的抑菌作用。(2)采用MTT法研究了它們對(duì)人肝癌細(xì)胞Hep-G2的抑制作用，結(jié)果表明，蜆殼花椒果皮總皂苷對(duì)人肝癌細(xì)胞Hep-G2無(wú)抑制作用，總多糖和總生物堿對(duì)人肝癌細(xì)胞Hep-G2的生長(zhǎng)具有抑制活性，其中總多糖的抑制活性最強(qiáng)。
　　 鑒于蜆殼花椒果皮多糖具有良好的抗腫瘤活性，本文應(yīng)用響應(yīng)面分析法對(duì)蜆殼花椒果皮總多糖的提取工藝進(jìn)行研究，在單因素實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)上選取實(shí)驗(yàn)因素與水平，

4、根據(jù)中心組合(Box-Benhnken)設(shè)計(jì)原理采用三因素三水平的響應(yīng)面分析法，得到多元二次線性回歸方程，以多糖提取率為響應(yīng)值作響應(yīng)面和等高線，確定蜆殼花椒果皮總多糖的最佳提取工藝為：以蒸餾水為提取溶劑，提取溫度94℃、液料比82:1、提取時(shí)間146min、提取2次，在此條件下多糖提取率可達(dá)4.99％。
　　 以MTT法和移植性H22實(shí)體荷瘤小鼠為模型，檢測(cè)不同劑量蜆殼花椒果皮多糖的體內(nèi)外抗腫瘤作用。結(jié)果表明當(dāng)樣品濃度為62，5

5、～1000μg.mL-1范圍內(nèi)，對(duì)體外培養(yǎng)的Hela、SMMC-7721、Hep-G2三株腫瘤細(xì)胞增殖均有抑制作用，且呈現(xiàn)出一定的濃度依賴(lài)關(guān)系，IC50依次為460.9μg·mL-1、425.6μg·mL-1、570.4μg·mL-1，體內(nèi)實(shí)驗(yàn)表明，蜆殼花椒果皮多糖高(1.5g·kg-1)、中(0.75g·kg-1)，低(0.375g·kg-1)劑量組均能抑制荷瘤小鼠瘤塊的生長(zhǎng)，抑瘤率依次為41.55%、34.96%、33.71%；通過(guò)