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1、目的:清火敗毒飲方(qinghuobaiduyin,QHBDY)為中南大學(xué)湘雅三醫(yī)院燒傷整形科的臨床驗(yàn)方,主要由黃芪、金銀花、黃芩、麥冬和大黃組成,其主要作用包括清熱解毒,活血祛瘀,益氣養(yǎng)陰等,自1996年來(lái)應(yīng)用于臨床,效果良好。本科室以往的研究表明清火敗毒飲方(qinghuobaiduyin,QHBDY)對(duì)特重度燒傷患者的體液免疫、細(xì)胞免疫功能均有明顯調(diào)節(jié)作用,且為雙向性調(diào)節(jié)。本研究主要是探討清火敗毒飲(qinghuobaiduyin
2、,QHBDY)對(duì)燒傷SD大鼠小腸粘膜的保護(hù)作用及其對(duì)腸粘膜細(xì)胞凋亡的影響。
方法:選擇健康SD(Sprague-Dawley)大鼠45只,雌雄不拘,隨機(jī)分為對(duì)照組、單純燒傷組(稱燒傷組)、燒傷后QHBDY治療組(稱治療組)。對(duì)照組n=5只,燒傷組n=20只,分別于燒傷后6h、12h、24h、48h4個(gè)時(shí)間點(diǎn)取標(biāo)本,每個(gè)時(shí)間點(diǎn)設(shè)有5只大鼠。治療組n=20,于燒傷前24小時(shí)內(nèi)以含生藥1.0g/L的QHBDY方湯劑1.0ml/1
3、00g劑量對(duì)大鼠經(jīng)口腔灌胃兩次做預(yù)處理,分別于燒傷后6、12、24、48h4個(gè)時(shí)間點(diǎn)取小腸粘膜組織,每個(gè)時(shí)間點(diǎn)設(shè)有5只SD大鼠。治療組每只大鼠在傷后5分鐘內(nèi)以含生藥1.0g/L的QHBDY方湯劑1.0ml/100g經(jīng)口腔灌胃。以免疫組織化學(xué)的方法檢測(cè)分析各組小腸粘膜組織凋亡因子Caspase-3、Bcl-2的表達(dá)情況,以TUNEL法檢測(cè)分析各組小腸組織粘膜組織細(xì)胞凋亡情況,同時(shí)觀測(cè)各組小腸組織粘膜的病理形態(tài)學(xué)變化。
結(jié)果:
4、傷后各時(shí)間點(diǎn)小腸粘膜細(xì)胞凋亡率均較對(duì)照組明顯升高(P<0.05),傷后6-12小時(shí)細(xì)胞凋亡到達(dá)高峰,24小時(shí)明顯減少,48小時(shí)又出現(xiàn)第二次升高;治療組除6小時(shí)時(shí)間點(diǎn)外其余各時(shí)間點(diǎn)細(xì)胞凋亡率分別低于燒傷組相同時(shí)間點(diǎn)細(xì)胞凋亡率且有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。傷后各時(shí)間點(diǎn)Caspase-3的表達(dá)均較對(duì)照組明顯升高且有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),傷后6-12小時(shí)Caspase-3表達(dá)最高,24小時(shí)又開始降低,48小時(shí)又出現(xiàn)第二次升高;治療組除6
5、小時(shí)時(shí)間點(diǎn)外其余各時(shí)間點(diǎn)Caspase-3的表達(dá)水平分別低于燒傷組相同時(shí)間點(diǎn)Caspase-3的表達(dá)水平且有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。傷后各時(shí)間點(diǎn)Bcl-2表達(dá)均較對(duì)照組降低且有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),傷后6-12小時(shí)Bcl-2表達(dá)最低,24小時(shí)已經(jīng)開始升高,48小時(shí)又出現(xiàn)第二次降低;治療組除6小時(shí)時(shí)間點(diǎn)外其余各時(shí)間點(diǎn)Bcl-2的表達(dá)水平和燒傷組相同時(shí)間點(diǎn)Bcl-2的表達(dá)水平之間的差異均具有顯著性(P<0.05)。病理形態(tài)學(xué)變化顯
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