桑樹根際微生物研究.pdf

1、選擇山東農(nóng)業(yè)大學蠶?？蒲谢夭煌柿Φ纳涓H土壤，桑樹品種為湖桑32。采用三點取樣法，采集根際土樣。通過平板梯度稀釋培養(yǎng)，對不同肥力土壤桑樹根際細菌、真菌和放線菌進行了分離和測數(shù)，研究了其數(shù)量變化。利用選擇性培養(yǎng)基對固氮細菌、解磷細菌和解鉀細菌進行了分離篩選。采用細菌基因組重復序列PCR技術(shù)(簡稱mp-PCR．)，對根際細菌進行了聚類分析。選用Shannom-Wener指數(shù)(H′)、豐富度指數(shù)(S)、Pielou均勻度指數(shù)(J)和Si

2、mpmn優(yōu)勢度指數(shù)(D)，分析了三類根際促生細菌的多樣性。采用菌體形態(tài)和菌落特征、生理生化特征和16S rDNA序列同源性分析對桑樹根琢促生細菌進行了鑒定。運用乙炔還原法(ARA')測定了圃氮細菌的固氮酶活性；通過測定菌落周圍產(chǎn)生的透明圈和混濁圈的大小，對解磷紐菌的解磷能力進行了比較；采用火焰分光光度計測定了解鉀細菌的解鉀能力。主要結(jié)果如下。 不同肥力條件下，肥沃土壤桑樹根際細菌以及固氮細菌、解磷細菌、解鉀細菌和放線菌的數(shù)量均高

3、于貧瘠土壤，而根際真菌的數(shù)量低于貧瘠土壤：肥沃土壤桑樹根際氨化細菌、纖維素分解菌、硝化細菌、反硫化細菌的數(shù)量高于貧瘠土壤，而反硝化細菌與硫化細菌的數(shù)量低于貧瘠土壤。相同肥力條件下，桑樹根際解磷細菌的數(shù)量最多，解鉀細菌的數(shù)量次之，固氮細菌的數(shù)量最少。 根際細菌的rep-PCR基因指紋分析結(jié)果表明，在種的水平上，肥沃和貧瘠土壤根際細菌分別被分為71個和33個聚類群；肥沃土壤根際促生細菌分為33個聚類群，其中包括10個固氮細菌聚類群、

4、14個解磷細菌聚類群和14個解鉀細菌聚類群；貧瘠土壤根際促生細菌分為28個聚類群，其中包括11個固氮細菌聚類群、13個解磷細菌聚類群和10個解鉀細菌聚類群;通過rep-PcR基因指紋分析，得到固氮細菌18株，解磷細菌18株，解鉀細菌23株。 不同肥力條件下，肥沃土壤根際細菌、解磷細菌和解鉀細菌的多樣性、豐富度、均勻度指數(shù)均高于貧瘠土壤，而優(yōu)勢度指數(shù)低于貧瘠土壤：肥沃土壤固氮細菌的多樣性指數(shù)、均勻度和優(yōu)勢度指數(shù)較低，而豐富度指數(shù)較

5、高。這些結(jié)果說明，土壤肥沃程度對根際細菌的種類和數(shù)量均有影響，肥沃土壤適于多數(shù)細菌的生長繁殖，類群比較豐富，而貧瘠土壤由于缺乏營養(yǎng)物質(zhì)，只有少量生命力較強的類群可以定殖，優(yōu)勢度指數(shù)較高。桑樹根際促生細菌鑒定結(jié)果表明，固氮細菌以貪噬菌屬(Variovoraxsp．)為主，解磷細菌和解鉀細菌以假單胞菌屬(Pseudomonas sp．)為主，各菌株的16S rDNA序列已在GenBank上注冊。 桑樹根際促生細菌的生物活力測定結(jié)果顯