BKCa通道參與杏仁核突觸可塑性調(diào)節(jié)的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、焦慮癥是最常見的心理障礙之一，對其發(fā)病機(jī)制和防治一直是該領(lǐng)域的研究熱點(diǎn)。大電導(dǎo)鈣激活鉀通道（BKCa）在中樞神經(jīng)系統(tǒng)廣泛分布，對神經(jīng)元興奮性具有重要調(diào)節(jié)作用。通道激活可產(chǎn)生后超極化電位（AHP）而降低膜興奮性，從而減少神經(jīng)元電活動，調(diào)節(jié)神經(jīng)遞質(zhì)釋放和神經(jīng)網(wǎng)絡(luò)功能。然而，杏仁核BKCa通道激活引起的細(xì)胞膜超極化以及對局部神經(jīng)網(wǎng)絡(luò)興奮性是否具有潛在的抑制作用，即BKCa通道與焦慮癥發(fā)病的關(guān)系，尚無文獻(xiàn)報(bào)道。本項(xiàng)目利用電生理、分子生物學(xué)和行為

2、學(xué)方法相結(jié)合，探討B(tài)KCa通道參與杏仁核突觸可塑性的關(guān)系，提出杏仁核BKCa通道功能異常，可能參與了焦慮癥的病理發(fā)生過程。
　　目的
　　以BKCa通道為研究對象，闡明BKCa通道參與杏仁核突觸可塑性調(diào)節(jié)的關(guān)系，以及在焦慮發(fā)病中的作用；并探討潛在的藥理學(xué)治療的可行性。
　　方法
　　1）采用腦薄片全細(xì)胞膜片鉗技術(shù)，研究杏仁核側(cè)核（LA）BKCa通道在對錐體神經(jīng)元興奮性，以及介導(dǎo)后超極化（AHP）功能中的作用；調(diào)節(jié)

3、BKCa通道功能對杏仁核側(cè)核下丘腦通路突觸可塑性的影響。
　　2）采用免疫組織化學(xué)標(biāo)記技術(shù)，觀察BKCa通道在正常動物杏仁核側(cè)核中間神經(jīng)元與錐體神經(jīng)元上表達(dá)。
　　3）觀察LA局部微注射BKCa通道特異性激動劑NS1619和阻斷劑Paxilline對小鼠焦慮行為的作用。通過自然焦慮反應(yīng)檢測實(shí)驗(yàn)：高臺十字迷宮和開場活動試驗(yàn)，考察BKCa通道功能與焦慮行為的相關(guān)性。
　　結(jié)果
　　BKCa通道在杏仁核錐體神經(jīng)元和中間

4、神經(jīng)元均表達(dá)；免疫共沉淀結(jié)果顯示，BKCa通道與NMDA受體中NR2A和NR2B亞基存在共定位；激活BKCa通道可降低杏仁核錐體神經(jīng)元興奮性，增強(qiáng)后超極化電位（AHP），細(xì)胞內(nèi)給以鈣離子緩沖劑BAPTA可抑制BKCa對神經(jīng)元興奮性的影響；抑制BKCa通道可顯著增強(qiáng)杏仁核下丘腦信號傳入通路的LTP，而不影響突觸前遞質(zhì)釋放；阻斷BKCa通道可增加NMDA受體介導(dǎo)的突觸后電流。
　　結(jié)論
　　研究結(jié)果表明，BKCa通道和NMDAR