FoxO3a在大鼠胚胎神經(jīng)細胞LTP過程中的早期表達變化的研究.pdf

1、目的：觀察Kcl刺激誘導(dǎo)大鼠腦皮質(zhì)神經(jīng)細胞后不同時間點FoxO3a及與其表達調(diào)控相關(guān)的基因Ras、Raf、MEK、ERKl、ERK2、PI3K、Akt、P27kip及Bim表達的變化，初步探討FoxO3a與這九個基因的相互作用對活動依賴性神經(jīng)細胞生長、存活的作用及影響。
　　方法：原代細胞培養(yǎng)獲取胎齡17 d大鼠腦皮質(zhì)神經(jīng)細胞；收集胎齡11 d至出生1 d的大鼠腦皮質(zhì)組織；采用RT-PCR方法分別檢測Kcl刺激誘導(dǎo)的大鼠腦皮質(zhì)及不

2、同發(fā)育時期大腦皮質(zhì)組織中 FoxO3a以及相關(guān)九個基因在轉(zhuǎn)錄水平的表達情況。
　　結(jié)果：原代細胞培養(yǎng)顯示細胞狀態(tài)良好。RT-PCR顯示，在Kcl刺激誘導(dǎo)的大鼠腦皮質(zhì)神經(jīng)細胞中：(1)FoxO3a、Ras、Raf、MEK、ERKl、ERK2、PI3K、Akt、P27kip及BimmRNA在各組不同時間點神經(jīng)細胞中均有表達；(2)FoxO3a mRNA在Kcl刺激誘導(dǎo)后30 min、3 h表達均低于正常對照組(P<0.05)，且30

3、min表達最低，12h表達最高；(3)Ras mRNA在Kcl刺激誘導(dǎo)后30min表達最低，3h表達最高，在6h、12h較正常對照組表達差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)；(4)Raf mRNA在Kcl刺激誘導(dǎo)后30 min、6 h、12 h表達均低于正常對照組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)；(5)MEK mRNA在刺激誘導(dǎo)后3 h表達最高，在30 min、6 h、12 h表達均低于正常對照組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)；(6)

4、ERK1在Kcl刺激誘導(dǎo)后30 min、12 h表達均低于正常對照組(P<0.05)，在3 h表達最高，在6 h的表達下降，且與正常對照組相比差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)；(7)ERK2在Kcl刺激誘導(dǎo)后30 min、12 h表達均低于正常對照組(P<0.05)，在3 h表達最高，在6 h表達下降，且與正常對照組相比差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)；(8)PI3K在 Kcl刺激誘導(dǎo)后30 min、12 h表達均低于正常對照組(P<0

5、.05)；在3 h、6 h表達均高于正常對照組(P<0.05)，且3 h表達最高；(9)Akt在Kcl刺激誘導(dǎo)后3 h表達最高，在30 min、6 h、12 h表達均低于正常對照組(P<0.05)；(10)P27kip在 Kcl刺激誘導(dǎo)各時間點表達均低于正常對照組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)；(11)Bim在Kcl刺激誘導(dǎo)12 h的表達低于正常對照組(P<0.05)，30 min、3 h、6 h的表達與正常對照組相比，差異無統(tǒng)計學(xué)