姜黃素對(duì)MPTP所致多巴胺能神經(jīng)元損傷的保護(hù)作用及機(jī)制.pdf

1、目的：探討姜黃素對(duì)MPTP所致多巴胺能神經(jīng)元損傷的保護(hù)作用及可能機(jī)制. 方法：將清潔級(jí)雄性C57BL/6J小鼠40只,16-20周齡,體重20-30克,隨機(jī)分成5組,因姜黃素溶于DMSO,所以要考慮溶劑DMSO對(duì)實(shí)驗(yàn)有無(wú)影響,因此分組如下:實(shí)驗(yàn)組1(Cur20+MPTP,姜黃素20 mg.kg<'-1>.d<'-1>);實(shí)驗(yàn)組2(Cur50+MPTP,姜黃素50mg.kg<'-1>.d<'-1>);對(duì)照組1(NS+MPTP);對(duì)

2、照組2(DMSO+MPTP)和正常對(duì)照組(DMSO+NS).實(shí)驗(yàn)組每天定點(diǎn)稱(chēng)體重分別按姜黃素20 mg.kg<'-1>、50 mg.kg<'-1>灌胃×7天,每天一次,在第7天,姜黃素灌胃后1小時(shí),按體重一次性腹腔注射MPTP(40mg.kg<'-1>);對(duì)照組1、2同實(shí)驗(yàn)組分別予等量NS和DMSO灌胃7天,第7天灌胃后1小時(shí),稱(chēng)體重一次性腹腔注射MPTP(40 mg.kg<'-1>)造模;正常對(duì)照組予等量DMSO灌胃7天,第7天灌胃后

3、1小時(shí)腹腔注射生理鹽水. 第14天,小鼠被脫頸髓處死,分離出黑質(zhì)和紋狀體.檢測(cè)指標(biāo): (1)采用高效液相色譜電化學(xué)(HPLC-ECD)法檢測(cè)小鼠紋狀體DA和其代謝產(chǎn)物HVA的含量. (2)采用免疫組織化學(xué)法檢測(cè)酪氨酸羥化酶(TH)陽(yáng)性細(xì)胞數(shù),以了解黑質(zhì)內(nèi)DA神經(jīng)元的變性和壞死情況.(3)測(cè)黑質(zhì)GSH,SOD活性(4)測(cè)體外姜黃素清除DPPH·自由基的能力. 結(jié)果： (1)紋狀體DA和HVA含量、黑質(zhì)TH陽(yáng)性神經(jīng)元

4、數(shù)量以及黑質(zhì)中SOD、GSH活性測(cè)定結(jié)果均顯示對(duì)照組1、2(NS+MPTP,DMSO+MPTP)與正常對(duì)照組(DMSO+NS)相比有明顯降低以及對(duì)照組1、2之間無(wú)差別(p<0.05),這些結(jié)果均證實(shí)DMSO對(duì)我們的實(shí)驗(yàn)結(jié)果沒(méi)有影響以及我們制作的PD模型是成功的. (2)HPL.C結(jié)果顯示:對(duì)照組1、2(Ns+MPTP,DMSO+MPTP)小鼠紋狀體內(nèi)DA和HVA含量較正常對(duì)照組顯著降低,降低約70﹪;實(shí)驗(yàn)組(Cur20+MPTP

5、,Cur50+MPTP)小鼠紋狀體內(nèi)DA和IHVA含量較對(duì)照組1、2明顯升高(p<0.05). (3)TH免疫組化結(jié)果顯示:與正常對(duì)照組(DOMS+NS)比較,對(duì)照組1、2(Ns+MPTP,DMSO+MPTP)小鼠中腦黑質(zhì)TH陽(yáng)性神經(jīng)元數(shù)量明顯減少(p<0.05);實(shí)驗(yàn)組1、2(Cur20+MPTP,Cur50+MPTP)小鼠中腦黑質(zhì)TH陽(yáng)性神經(jīng)元數(shù)目明顯高于對(duì)照組1、2(p<0.05). (4)黑質(zhì)GSH,SOD測(cè)定結(jié)

6、果顯示:較正常對(duì)照組,對(duì)照組1、2(Ns+MPTP,DMSO+MPTP)GSH,SOD活性明顯降低,與對(duì)照組1、2比較,實(shí)驗(yàn)組(Cur20+MPTP,Cur50+MPTP)GSH、SOD活性顯著升高(p<0.05). (5)體外測(cè)姜黃素具有顯著的清除DPPH·自由基的能力. 結(jié)論： (1)MPTP制作的小鼠PD模型是成功的. (2)姜黃素對(duì)MPTP所致的小鼠多巴胺能神經(jīng)元損傷具有保護(hù)作用. (3)