團(tuán)頭魴突變體鑒定、雌核發(fā)育、雌二醇誘導(dǎo)及卵泡抑素2對(duì)其生長(zhǎng)作用的研究.pdf

1、團(tuán)頭魴(Megalobrama amblycephala)俗稱(chēng)武昌魚(yú),原產(chǎn)于我國(guó)長(zhǎng)江中游一些湖泊中,是我國(guó)所特有的重要草食性經(jīng)濟(jì)養(yǎng)殖魚(yú)類(lèi)之一。經(jīng)過(guò)多年選育，現(xiàn)已有團(tuán)頭魴良種，然而選育無(wú)止境；為更好的滿(mǎn)足日益擴(kuò)大的市場(chǎng)需求，團(tuán)頭魴良種的選育及研究至關(guān)重要，本研究分別通過(guò)對(duì)團(tuán)頭魴突變體的鑒定研究、團(tuán)頭魴的雌核發(fā)育、雌二醇誘導(dǎo)及FST2基因?qū)ιL(zhǎng)影響的實(shí)驗(yàn)，為團(tuán)頭魴的育種提供一定的資料依據(jù)。
　　首先，本研究以自然環(huán)境下發(fā)現(xiàn)的5尾紅色鳊

2、魚(yú)（雌魚(yú)3尾，雄魚(yú)2尾）為材料，對(duì)其進(jìn)行了種質(zhì)遺傳鑒別。實(shí)驗(yàn)分別測(cè)量了這5尾鳊魚(yú)7項(xiàng)可數(shù)性狀、11項(xiàng)可量性狀和20項(xiàng)框架，并與實(shí)驗(yàn)室所測(cè)6個(gè)鳊魴魚(yú)類(lèi)群體形態(tài)框架做主成分分析，結(jié)果表明，這5尾紅色鳊魚(yú)在可量性狀上單獨(dú)聚類(lèi)，且與團(tuán)頭魴較近；研究發(fā)現(xiàn)這5尾紅色鳊魚(yú)與魴屬東江三角魴、錢(qián)塘江三角魴、廣東魴、厚頜魴以及鳊屬長(zhǎng)春鳊的微衛(wèi)星標(biāo)記都不同，但與魴屬的團(tuán)頭魴相似；最后，對(duì)這5尾紅色鳊魚(yú)的COX1和COX2基因進(jìn)行測(cè)序，并與其它近緣物種進(jìn)行聚類(lèi)

3、分析，發(fā)現(xiàn)這5尾突變體間與團(tuán)頭魴的親緣關(guān)系接近，屬于團(tuán)頭魴的自發(fā)體色突變體，紅色團(tuán)頭魴可為團(tuán)頭魴的遺傳學(xué)和育種學(xué)研究提供寶貴的研究材料。
　　在雌核發(fā)育育種上，本研究分別利用遺傳失活的紅鯽魚(yú)和鯽魚(yú)精子，采用冷休克方法人工誘發(fā)團(tuán)頭魴二倍體雌核發(fā)育。對(duì)激活后5 min、10min、15min的團(tuán)頭魴受精卵分別在0-4℃低溫條件下進(jìn)行染色體加倍處理10min、20min、30min，得出各組條件下的受精率、出苗率和成活率。在實(shí)驗(yàn)條件下，

4、用紅鯽魚(yú)精子誘導(dǎo)的團(tuán)頭魴雌核發(fā)育效果比鯽魚(yú)精子的好。紅鯽魚(yú)精子誘導(dǎo)的團(tuán)頭魴雌核發(fā)育最佳實(shí)驗(yàn)條件為受精后5 min后0-4℃冷休克20 min，平均存活率為12.5±3.6％；用鯽魚(yú)精子誘導(dǎo)的團(tuán)頭魴雌核發(fā)育最佳實(shí)驗(yàn)條件為受精10 min后0-4℃冷休克20 min，其次為受精后5 min后0-4℃冷休克20 min，其平均存活率為2.1±0.6%。實(shí)驗(yàn)較詳細(xì)研究了團(tuán)頭魴的雌核發(fā)育的條件，為之后團(tuán)頭魴良種保存、育種奠定了一定的基礎(chǔ)。

5、　　本研究通過(guò)對(duì)出苗15天的相同大小規(guī)格團(tuán)頭魴幼苗分別用濃度為0、10、30、100、200、300μg/L的雌二醇浸泡處理60天，然后在網(wǎng)箱中養(yǎng)殖，發(fā)現(xiàn)其存活率分別為73.3%、87.5%、40.0%、41.6%、52.5%、4.2%；在網(wǎng)箱養(yǎng)殖1個(gè)月后，測(cè)量各濃度雌二醇處理組的體長(zhǎng)、體高和體重作為第一次測(cè)量數(shù)據(jù)，網(wǎng)箱養(yǎng)殖第2個(gè)月后，再次測(cè)量各組體長(zhǎng)、體高和體重作為第二次測(cè)量數(shù)據(jù)，通過(guò)這2組數(shù)據(jù)，算出其體長(zhǎng)、體高和體重的平均增長(zhǎng)值，發(fā)

6、現(xiàn)雌二醇處理的各組數(shù)值均比對(duì)照組小。其中，在100μg/L濃度的雌二醇處理?xiàng)l件下，體高增長(zhǎng)比對(duì)照組小，差異性不顯著；在10μg/L濃度處理?xiàng)l件下，體高增長(zhǎng)比對(duì)照組小，差異性顯著；而實(shí)驗(yàn)組其它各項(xiàng)平均值都比對(duì)照組小，且差異性極顯著。實(shí)驗(yàn)說(shuō)明了在實(shí)驗(yàn)濃度下的雌二醇處理對(duì)團(tuán)頭魴幼苗的生長(zhǎng)有顯著的抑制作用。
　　實(shí)驗(yàn)驗(yàn)通過(guò)對(duì)轉(zhuǎn)FST2基因的團(tuán)頭魴的研究，發(fā)現(xiàn)FST2基因轉(zhuǎn)入團(tuán)頭魴中的陽(yáng)性個(gè)體很少，存活率很低，通過(guò)對(duì)存活陽(yáng)性個(gè)體及對(duì)照組個(gè)體