腫瘤細(xì)胞株Hela膜表面糖鏈對(duì)GJIC的影響及機(jī)制的初步探討.pdf

1、中國(guó)海洋大學(xué)碩士學(xué)位論文腫瘤細(xì)胞株Hela膜表面糖鏈對(duì)GJIC的影響及機(jī)制的初步探討姓名：王麗娟申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士專業(yè)：生藥學(xué)指導(dǎo)教師：辛現(xiàn)良20080601Cx43是一個(gè)不含糖基化位點(diǎn)的蛋白，因此唾液酸和D1，6分支的減少不會(huì)對(duì)其起到直接的作用。推測(cè)其它蛋白上唾液酸和D1，6分支的減少(如細(xì)胞間粘附分子)通過影響自身的功能，進(jìn)而引起一系列的變化，從而影響了Cx43及其相關(guān)蛋白表達(dá)及分布，并進(jìn)一步影響了通道的形成、開放。目前研究糖鏈主要

2、通過化學(xué)工具藥及分子生物學(xué)等手段，在本文中采用了化學(xué)工具藥(衣霉素、唾液酸苷酶)以及RNA干擾的技術(shù)抑制糖基化，并利用了現(xiàn)代分子生物學(xué)技術(shù)，細(xì)胞生物學(xué)技術(shù)、多種激光生物學(xué)(LSM、FCM)技術(shù)，研究了腫瘤細(xì)胞株Hela膜表面大量異常糖鏈的表達(dá)對(duì)OJIC的影響，并對(duì)腫瘤細(xì)胞膜表面大量異常唾液酸表達(dá)抑制OJIC的機(jī)制進(jìn)行了初步的探討。本文利用衣霉素、唾液酸苷酶等化學(xué)工具藥去除膜表面相應(yīng)糖鏈以及RNA干擾技術(shù)瞬時(shí)沉默Hela細(xì)胞中CmTV活性

3、，經(jīng)劃痕染料示蹤(SLDT)及熒光淬滅恢復(fù)(F凡心)實(shí)驗(yàn)檢測(cè)，結(jié)果均都檢測(cè)到Heb細(xì)胞GJIC增強(qiáng)：唾液酸苷酶去除HeLa細(xì)胞表面砣3及酡6唾液酸后，通過對(duì)機(jī)制的初步探討研究發(fā)現(xiàn)，Cx43表達(dá)水平及磷酸化變化不明顯，但Cx43分布發(fā)生變化，使位于間隙連接斑處的Cx43增多：且另外兩個(gè)Cx43相關(guān)蛋白ZO1／NCadherin總體的表達(dá)量不變，但能降低NCadherin分子的唾液酸含量，導(dǎo)致NCadhorin與Cx43共定位增多，同時(shí)使與