HO-CO系統(tǒng)在血液系統(tǒng)疾病中的表達(dá)及其對造血調(diào)控的作用.pdf

1、[目的] 檢測血液系統(tǒng)疾病(缺鐵性/巨幼紅細(xì)胞性貧血、再生障礙性貧血、骨髓增生異常綜合征和急性非淋巴細(xì)胞白血病)患者骨髓單個核細(xì)胞血紅素加氧酶(HO)的表達(dá)，分析其在疾病發(fā)病中的意義。進(jìn)一步探討HO-CO系統(tǒng)與Ras-MAPK、JAK-STAT信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑分子表達(dá)的關(guān)系。 [方法] 以IDA/MA、AA、ANLL患者各20例、MDS患者30例、健康人10例為研究對象，抽吸法采集骨髓(1)半定量RT-PCR法檢測患者骨髓單個核細(xì)胞

2、HO-1、STAT5、Raf-1 mRNA的表達(dá)。 (2)無菌條件下培養(yǎng)MDS-RAEB患者骨髓單個核細(xì)胞，將HO-1誘導(dǎo)劑氯化高鐵血紅素(Hemin)，依照1μmol/L、5μmol/L、10μmol/L的濃度分別加入RPMI-1640培養(yǎng)體系，半定量RT-PCR法檢測各組HO-1、STAT5、Raf-1 mRNA的表達(dá)，ELISA方法檢測各組培養(yǎng)液上清VEGF、IL-1β、TNF-α表達(dá)水平。 (3)計量數(shù)據(jù)以均數(shù)±

3、標(biāo)準(zhǔn)差(X±S)的形式表示。各基因mRNA表達(dá)水平用目的基因和β-actin兩電泳帶光密度的比值描述。統(tǒng)計軟件使用spss11.5軟件包中的單因素方差分析、Newman-Keuls檢驗、Spearman等級相關(guān)檢驗，檢驗水準(zhǔn)α=0.05。 [結(jié)果] (1)①IDA/MA患者骨髓單個核細(xì)胞HO-1 mRNA表達(dá)水平(0.86±0.11)明顯高于對照組(0.57±0.15)(P<0.05)；STAT5 mRNA表達(dá)水平(1.07±0

4、.41)明顯高于對照組(0.79±0.32)(P<0.05)；Raf-1mRNA表達(dá)水平(0.58±0.17)明顯高于對照組(0.35±0.09)(P<0.05)。②從患者骨髓骨髓單個核細(xì)胞HO-1mRNA表達(dá)水平(0.36±0.12)明顯低于對照組(0.57±0.15)(P<0.01)；STAT5 mRNA表達(dá)水平(0.53±0.30)明顯低于對照組(0.79±0.32)(P<0.05)；Raf-1 mRNA表達(dá)水平(0.19±0.1

5、6)明顯低于對照組(0.35±0.09)(P<0.05)。③MDS患者骨髓單個核細(xì)胞HO-1 mRNA表達(dá)(1.24±0.42)明顯高于對照組(0.57±0.15)(P<0.01)；STAT5 mRNA表達(dá)水平(1.46±0.18)明顯高于對照組(0.79±0.32)(P<0.05)；Raf-1 mRNA表達(dá)水平(0.77±0.08)明顯高于對照組(0.35±0.09)(P<0.05)。④ANLL患者骨髓骨髓單個核細(xì)胞HO-1mRNA表

6、達(dá)水平(1.04±0.38)明顯高于對照組(0.57±0.15)(P<0.05)；STAT5mRNA表達(dá)水平(1.72±0.57)明顯高于對照組(0.79±0.32)(P<0.01)；Raf-1mRNA表達(dá)水平(1.13±0.23)明顯高于對照組(0.35±0.09)(P<0.01)。⑤HO-1mRNA的表達(dá)和Raf-1、STAT5 mRNA的表達(dá)呈正相關(guān)(Raf-1 rx=0.334，P<0.01：STAT5 rs=0.287，P<0

7、.05)。 (2)MDS-RAEB患者骨髓體外加入Hemin孵育后，單個核細(xì)胞HO-1表達(dá)水平均高于未給藥組(P<0.05)，HO-1表達(dá)水平和Hemin濃度呈正相關(guān)(rs=0.763，P<0.02)，Raf-1mRNA的表達(dá)水平均低于未給藥組，與HO-1的表達(dá)水平呈負(fù)相關(guān)(rs=0.371，P<0.05)，STAT5mRNA的表達(dá)水平加或不加Hemin，兩組無顯著差異(P>0.05)，VEGF、IL-1β、TNF-α表達(dá)水平均低于未

8、給藥組，呈Hemin濃度依賴性下降，各因子表達(dá)水平分別與HO-1的表達(dá)水平呈負(fù)相關(guān)(VEGF rs=0.447，P<0.02；IL-1β rs=0.382，P<0.05；TNF-α rs=0.459，P<0.02)。與未給藥組相比，Hemin濃度10μmol/L組VEGF的表達(dá)水平下降56.8％，IL-1β的表達(dá)水平下降43.7％，TNF-α的表達(dá)水平下降48.4％。 [結(jié)論] (1)缺鐵性/巨幼紅細(xì)胞性貧血、再生障礙性貧血、骨

9、髓增生異常綜合征和急性非淋巴細(xì)胞白血病發(fā)病過程中均存在HO表達(dá)異常，HO可能在造血調(diào)控過程中發(fā)揮作用；缺鐵性/巨幼紅細(xì)胞性貧血、再生障礙性貧血、骨髓增生異常綜合征和急性非淋巴細(xì)胞白血病Raf-1、STAT5 mRNA的表達(dá)異常提示發(fā)病過程中存在Ras-ERK和JAK-STAT信號傳導(dǎo)通路異常，并且與HO的表達(dá)存在關(guān)聯(lián)。(2)在MDS-RAEB患者中，通過對HO-1的激活，觀察到HO-CO途徑與Ras-ERK信號傳導(dǎo)途徑分子的表達(dá)有交互影