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文檔簡介
1、兔左室壁三層心肌細胞非特異性陽離子電流的特性研究表明,心臟左室游離壁心內(nèi)膜下心肌,心外膜下心肌,中層心肌(M層)之間的復極存在差異,即存在心室跨壁復極離散度(TansmuralDispersionofRepolarization,TDR)。已知TDR在心室折返性心律失常的發(fā)生和維持中起重要作用,而M細胞與TDR的形成密切相關。M細胞指心外膜下接近心室肌中層的一組獨特的細胞亞群,該細胞與其它部位的心室肌細胞有著完全不同的電生理特性,其中最
2、顯著的特點是較長的動作電位時程(ActionPotentialDurastion,APD),這為折返性室性心律失常的發(fā)生提供了電生理基礎,同時也成為臨床上一些抗心律失常藥物的治療靶點。M細胞的APD之所以較心內(nèi)膜心肌細胞和心外膜心肌細胞長,主要是由于M細胞的IKs較小,同時也與M細胞有較大的INa-Ca和晚期INa有關。而在兔的心肌細胞上IKs的分布較小。近幾年,人們在兔心肌細胞發(fā)現(xiàn)了一種新的離子通道電流—非特異性陽離子通道電流(non
3、selectivecationchannel,INs),目前發(fā)現(xiàn)該通道電流主要包括牽張激活的INs;細胞外無鈣誘發(fā)的INs;胰島素激活INs,瞬時內(nèi)向電流ITi等。已有研究表明,INs與牽引發(fā)的心房顫動有關。因此INs越來越受到大家的重視,正在形成一個研究高潮。而INs與M細胞APD的關系,目前國際上未見相關報道。 目的:1、以兔左心室單個心肌細胞為研究對象,利用全細胞鉗制技術,觀察兔左心室肌細胞是否存在INs并探討其阻斷劑。
4、 2、INs在左室心肌細胞分布的異質性,初步探討其在TDR形成中的意義。 方法:使用膜片鉗全細胞鉗制技術,在單細胞離子通道水平,對單個心肌細胞進-1-行電壓、電流鉗制,記錄INs并比較其在三層心肌細胞的分布密度,分析其電流—電壓曲線。 結果:1、家兔左心室肌細胞去極化時可以引出一組外向電流,灌流液中加入4-AP(5mmol/L)阻斷后,該外向電流的峰值部分明顯減小,減小的峰值電流為Ito,仍剩余一個較大的外向電流,
5、我們將其稱為穩(wěn)態(tài)電流。 2、當NMDG+取代Na+,該離子的流的內(nèi)向部分明顯減小,但氯離子的阻斷劑DIDS對該離子流沒有影響。進一步的實驗證明該離子通道對單價陽離子K+、Cs+、Na+、Li+通透,對氯離子不能通透,因此是一種非特異性陽離子通道電流。由于其沒有時間依賴性失活與激活,是一種背景性電流,翻轉電位約-40mV。GdCl3(0.1mmol/L)和LaCl3(0.1mmol/L)對該電流有阻斷作用。 3、該通道電流
6、的密度在內(nèi)層心肌細胞、M細胞、外層心肌細胞的分布不同;當鉗制電壓為-80mV時,內(nèi)層心肌細胞、M細胞、外層心肌細胞的電流密度分別為-0.44PA/PF±0.05PA/PF,-0.12PA/PF±0.05PA/PF,-0.28PA/PF±0.07PA/PF,內(nèi)層心肌細胞和外層心肌細胞的電流密度較M細胞大,p=0.015和p=0.018,而內(nèi)層心肌細胞和外層心肌細胞電流通道密度無顯著差異,p=0.093;當鉗制電壓為+30mV時,內(nèi)層心肌細
7、胞、M細胞、外層心肌細胞的電流密度分別為1.09PA/PF±0.29PA/PF,0.38PA/PF±0.09PA/PF,0.90PA/PF±0.24PA/PF,內(nèi)層心肌細胞和外層心肌細胞的電流密度較M細胞大,p=0.023和p=0.019,而內(nèi)層心肌細胞和外層心肌細胞電流通道密度無顯著差異,p=0.73(n內(nèi)=12,n中=12,n外=10)。 結論:1、兔左心室存在INa,對單價陽離子Na+,K+,Li+,Cs+通透,對Cl-不
8、通透,GdCl3(0.1mmol/L)和LaCl3(0.1mmol/L)對該電流有阻斷作用。 2、該離子通道無明顯的時間依賴性激活與失活,是一種背景性電流,翻轉電位大約為-40mV,可能在靜息電位(RP)的形成中起到一定作用。 -2-3、該電流通道密度在左室的分布存在異質性,其中M細胞的電流通道密度明顯小于心內(nèi)膜下心肌細胞和心外膜下心肌細胞,因此該電流可能與Iks一起共同作用使M細胞的APD延長,可能對TDR的形成及折返
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