我國(guó)部分地區(qū)攜帶ystB基因小腸結(jié)腸炎耶爾森菌的分子流行病學(xué)研究.pdf

1、目的:了解我國(guó)部分地區(qū)小腸結(jié)腸炎耶爾森菌中ystB基因攜帶情況，分析攜帶ystB基因的小腸結(jié)腸炎耶爾森菌菌株的其它毒力基因攜帶特征、生物型、血清型、分子分型以及抗生素敏感試驗(yàn)，對(duì)其分子流行病學(xué)特征開展全面調(diào)查。 方法:常規(guī)培養(yǎng)小腸結(jié)腸炎耶爾森菌，使用API20E反應(yīng)條鑒定。PCR擴(kuò)增所有菌株的ystB基因(必要時(shí)進(jìn)行測(cè)序分析，并與GenBank公布的ystB基因：ACCESSION N0.D88145進(jìn)行比對(duì))。選擇ystB基因

2、陽性菌株進(jìn)行以下分析：PCR法擴(kuò)增毒力基因yadA、virF、ail和ystA，了解其毒力基因特征。膽汁七葉甙分解試驗(yàn)初步判斷其生物型，需要是采用多種生化反應(yīng)確認(rèn)。玻片凝集試驗(yàn)分析待檢菌株血清型。生物梅里埃ATBG-5試劑條分析菌株的抗生素敏感特征。脈沖場(chǎng)凝膠電泳試驗(yàn)進(jìn)行分子分型，使用Bio-Numerics數(shù)據(jù)庫軟件對(duì)脈沖場(chǎng)凝膠電泳結(jié)果進(jìn)行聚類分析。 結(jié)果:ystB基因在小腸結(jié)腸炎耶爾森菌的攜帶率為38.1％。所有攜帶ystB

3、基因的小腸結(jié)腸炎耶爾森菌其它毒力基因(yadA、virF、ail和ystA)均為陰性。所有攜帶ystB基因的小腸結(jié)腸炎耶爾森菌均為生物1A型。250株攜帶ystB基因的小腸結(jié)腸炎耶爾森菌包含至少23種血清型，其主要血清型為0：6，30，其次為0：8、0：7，8、0：5。多數(shù)菌株對(duì)阿莫西林、頭孢噻吩、替卡西林等抗生素耐藥，所有菌株對(duì)環(huán)丙沙星以及阿米卡星敏感。脈沖場(chǎng)凝膠電泳共形成167個(gè)型別，依次命名為K6GN11CB0001-K6GN11

4、CB0167。 結(jié)論：所有攜帶ystB基因的小腸結(jié)腸炎耶爾森菌均不攜帶其它毒力基因(yadA、virF、ail和ystA)。ystB基因僅存在于生物1A型小腸結(jié)腸炎耶爾森菌中。攜帶ystB基因的小腸結(jié)腸炎耶爾森菌的血清型組成較多，另外我國(guó)分離的O：8型小腸結(jié)腸炎耶爾森菌攜帶ystB基因而不攜帶其它毒力基因，且為生物1A型，完全不同于國(guó)外0：8型小腸結(jié)腸炎耶爾森菌特征。多數(shù)攜帶ystB基因的小腸結(jié)腸炎耶爾森菌對(duì)阿莫西林和部分頭孢菌