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文檔簡介
1、向日葵籽實含油量高,具有較高的經(jīng)濟價值,是我區(qū)重要的經(jīng)濟作物。但向日葵菌核病危害對向日葵生產(chǎn)威脅日益嚴(yán)重,至今未找到菌核病抗源。根據(jù)菌核病致病的關(guān)鍵因子一草酸,引入編碼草酸降解酶的基因來獲得對分泌草酸病原真菌的抗性是一個極具前途的方法。本實驗通過研究建立向日葵高效的遺傳轉(zhuǎn)化系統(tǒng),將來自于小麥的草酸氧化酶(Oxalate Oxidase,OXO)基因通過農(nóng)桿菌介導(dǎo)轉(zhuǎn)化星火花葵,取得以下結(jié)果: 向日葵莖尖轉(zhuǎn)化再生系統(tǒng)中適宜培養(yǎng)基為:
2、 Ⅰ.分化培養(yǎng)基:MS+0.5mg/L6-BA+0.25 mg/LIAA+0.1mg/LGA,pH 5.8Ⅱ.共培養(yǎng)培養(yǎng)基:分化培養(yǎng)基+100 μmol/LAS,pH 5.8Ⅲ.篩選培養(yǎng)基:分化培養(yǎng)基+50mg/LKan+500mg/LCef,pH 5.8Ⅳ.生根培養(yǎng)基:1/2 MS+25mg/LKan+300mg/LCef+0.5mg/LNAA,pH 5.8用OD<,600>為0.3~0.4左右時的農(nóng)桿菌侵染莖尖9 min~1
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