兩個枇杷品種成熟期果肉生理生化與蛋白質(zhì)組分析.pdf

1、枇杷(Eriobotrya japonica Lindl.),是原產(chǎn)于我國的一種亞熱帶水果。根據(jù)果實的顏色，一般將枇杷分為兩類：紅肉和白肉枇杷。一般情況下，與紅肉枇杷相比，白肉枇杷的果肉色澤發(fā)白，肉質(zhì)更加細膩多汁，香甜適口，貯藏期較短。而紅肉枇杷的果肉肉質(zhì)偏黃或紅，口感較差，但貯藏期更長。
　　在本次實驗中我們選取了成熟期兩個品種的枇杷的果實：‘黃金塊’(紅肉)枇杷和‘太城白蜜’(白肉)枇杷作為材料，研究了它們的果肉在成熟期的一些

2、生理指標(biāo)和蛋白質(zhì)組表達差異特征。
　　1.本文測定了類胡蘿卜素、可溶性糖和可滴定酸的含量。結(jié)果表明，‘黃金塊’枇杷可溶性糖含量大約是62mg/g，‘太城白蜜‘枇杷大約是97mg/g?！S金塊’枇杷可滴定酸度為0.14mmol/100g，‘太城白蜜’枇杷為0.04mmol/100g?！S金塊’枇杷類胡蘿卜素含量為14mg/g,‘太城白蜜’枇杷含量為2mg/g。這表明紅肉枇杷類胡蘿卜素含量較高，果色鮮艷，但果肉糖酸比低，果肉偏酸，可食

3、性較差。
　　2.本文對多酚氧化酶、超氧化物歧化酶、抗壞血酸脫氫酶和肉桂醇脫氫酶的活性進行測定。結(jié)果顯示，‘太城白蜜’枇杷多酚氧化酶的酶活性大概為‘黃金塊’枇杷的兩倍；兩種枇杷的抗壞血酸過氧化物酶及超氧化物歧化酶的酶活性變化差異較??；‘太城白蜜’枇杷的肉桂醇脫氫酶的活性相對于‘黃金塊’枇杷果實要高。因此，‘太城白蜜’枇杷果實較不耐貯存，而且在貯存過程會形成較多的木質(zhì)素。
　　3.本文利用蛋白質(zhì)組技術(shù)對成熟期的兩種枇杷果實的差

4、異蛋白進行分析，采用雙向電泳分離蛋白，在‘黃金塊’枇杷果肉中檢測到835個蛋白點，而在‘太城白蜜’枇杷果肉中到檢測826個蛋白點。以‘黃金塊’枇杷作為試驗組，‘太城白蜜’枇杷作為對照組，經(jīng)ImageMaster軟件分析后，顯示有46個差異明顯的蛋白質(zhì)點，經(jīng)MALDI-TOF-TOF質(zhì)譜分析，成功鑒定出40個非冗余蛋白，其中36個上調(diào)表達，4個下調(diào)表達。通過生物信息學(xué)分析，可將這些蛋白可分為:1.脅迫反應(yīng)和防御相關(guān)蛋白（10）；2.能量和

5、物質(zhì)代謝相關(guān)蛋白（10）；3.次生代謝相關(guān)蛋白（3）；4.蛋白質(zhì)代謝相關(guān)蛋白（4）；5.信號轉(zhuǎn)導(dǎo)相關(guān)蛋白（7）；6.過敏原蛋白；7.未分類的蛋白（4）。對差異蛋白的功能進行分析結(jié)果表明：（1）在成熟期，兩個品種枇杷果實中與類胡蘿卜素合成相關(guān)的蛋白表達豐度未出現(xiàn)明顯差異；（2）果實的貯藏性是多種蛋白相互作用的結(jié)果。信號轉(zhuǎn)導(dǎo)蛋白如14-3-3蛋白的上調(diào)表達，使果實提高忍受環(huán)境脅迫的能力；抗性脅迫相關(guān)蛋白以及MDH的上調(diào)表達，可增加還原力和能

6、量供給，提高細胞清除自由基和毒素的能力，防止蛋白變性、凝聚，維持細胞膜的流動性和完整性，提高抗逆性。從而使果實貯藏較長時間。
　　4.本文對HSP70蛋白進行了Western blot分析，其結(jié)果與雙向電泳的結(jié)果一致；對過敏原蛋白major allergen Mal d1基因進行克隆，利用得到的保守區(qū)序列和蘋果的同源基因進行比對發(fā)現(xiàn)，兩者的相似度達到98％。這一結(jié)果顯示我們的結(jié)果是可信的，也加深了對水果這一過敏源的了解，并為在分子