大鼠雙下肢擠壓傷模型生化指標與病理變化分析.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、目的:探討實驗用大鼠在相同重量擠壓條件下,經(jīng)歷不同擠壓時間,并在解除擠壓后特定時間內,缺血組織血液再灌注后分別對物理、病理、生化等指標的不同影響,并根據(jù)指標變化判斷此擠壓傷綜合征動物模型的成功與否。
  方法:實驗采用某機械公司生產的大鼠雙下肢擠壓傷模具,按實驗目的配置了大鼠固定臺、連接柱以及承重板等。采用隨機數(shù)字法,將48只健康Sprague-Dawley(SD)大鼠隨機分為實驗組(n=40只)和對照組(n=8只)。將實驗組大鼠

2、固定后,將10kg重的標準砝碼一次性瞬間加于承重板,按照預設定的時間持續(xù)進行壓迫。實驗過程中大鼠不給予進食、飲水,不作麻醉,正常呼吸空氣。對照組大鼠不作任何處理。實驗組中,各取8只大鼠分別擠壓3、6、12、24、48 h,共40只,肉眼觀察SD大鼠的存活與雙下肢活動,通過擠壓傷模具的排泄孔觀察大鼠有無血尿發(fā)生。大體觀察后,在解除壓迫后4h將各時間點實驗組大鼠在不作麻醉的情況下,用硬質長頸玻璃滴管(長3~4cm、毛細管內徑0.5~1.0m

3、m)直接通過大鼠眼內眥眼眶靜脈叢采血約2~3ml后,離心機(2000rpm)離心20min,接著將上層血清吸出,用全自動生化分析儀檢測以下生化指標:反映心肌損傷指標的CK含量,反映肝功能指標的ALT和AST含量和反映腎功能指標的K+、Cr、BUN含量。對照組的采血和檢測方法同實驗組。SD大鼠眼內眥采血后即做斷頸處死處理,取處死大鼠腎臟、心臟和受壓部位肌肉等組織標本,將取材后的標本固定(4%多聚甲醛緩沖液),并通過修剪、脫脂、石蠟包埋、5

4、um切片,蘇木精-伊紅(HE)染色等處理,將染色后肌肉、腎臟、心臟組織切片在x200光鏡下觀察其病理改變。
  結果:實驗組大鼠解除壓迫之后,雙下肢明顯腫脹,不能如擠壓前正?;顒印J軌翰课患∪饨M織解剖后可見肌肉水腫,顏色蒼白,肌肉的顏色隨著擠壓時間的延長漸呈暗紅色,并滲出淡紅色液體。實驗組擠壓3h大鼠未發(fā)生血尿,6h有2只(25.0%)、12h有3只(37.5%)、24h有3只(37.5%)、48h有5只(62.5%)發(fā)生血尿。(

5、x2=7.52,P>0.05)。指標Cr,K+的組間比較均無統(tǒng)計學差異(均P>0.05);實驗組3h、6h、24h、48h亞組ALT,各時間點亞組的AST,在3h、24h、48h亞組的BUN,以及24h、48h業(yè)組的CK均顯著高于對照組(均P<0.05)。壓迫解除4小時后,各組受壓卜肢腫脹程度不同,用腫脹最嚴重部位的周徑作為組間比較標準,各組間均未出現(xiàn)統(tǒng)計學差異(均P>0.05)。對照組:細胞完整,呈現(xiàn)正常的肌肉纖維結構,橫紋紋理清晰。

6、實驗組受壓的局部肌肉組織發(fā)生病理學改變:3h組血管擴張并發(fā)生充血,受壓肌肉組織出現(xiàn)輕度水腫,部分肌纖維表現(xiàn)為輕度腫脹及分離;24h組局部受壓肌肉可見肌纖維明顯腫脹,橫紋紋理模糊甚至消失,并呈現(xiàn)局灶性或彌漫性壞死;48 h組局部受壓肌肉肌纖維間質水腫,炎性細胞浸潤明顯,部分肌纖維發(fā)生斷裂或碎裂,橫紋、細胞核消失,細胞質呈勻質化。對照組:鏡下腎小管的上皮細胞完整,管腔中未見管型;腎小球結構正常。實驗組鏡下腎臟組織發(fā)生病理學改變:3h組腎小球

7、腫脹充血,間質中毛細血管發(fā)生擴張和充血,有紅細胞積聚在部分毛細血管內。擠壓12h組未見腎小球結構,腎小管間存在散在出血;24h組可見毛細血管擴張充血;48h組鏡下可見腎小管上皮細胞發(fā)生水腫、脫落、壞死,壞死改變最明顯部位為集合管和髓袢升段遠曲小管,管型物質(細胞成分、均質物質等)亦在大部分遠曲小管中出現(xiàn)。對照組:心肌細胞完整,纖維結構正常,橫紋紋理清晰。實驗組心肌病理學鏡下未見明顯改變:各時間點心肌結構與對照組相比無明顯變化。
 

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