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1、目的:觀察肝炎平對日本血吸蟲感染致肝纖維化家兔肝組織肝細胞生長因子(HGF)和轉(zhuǎn)化生長因子β1(TGF-β1)表達的影響,進一步探討中藥肝炎平的作用機制,為肝炎平的臨床應(yīng)用提供理論依據(jù)。 方法:實驗分3組:正常對照組(N組)、模型組(血吸蟲感染+吡喹酮組,M組)及肝炎平治療組(血吸蟲感染+吡喹酮+肝炎平治療組,E組)。N組正常飼養(yǎng)。模型組及肝炎平治療組均采用腹貼法(日本血吸蟲尾蚴180條/只,持續(xù)15分鐘)感染血吸蟲。在相同條件
2、飼養(yǎng)6周后,模型組及肝炎平治療組均給予抗血吸蟲治療(吡喹酮片,200mg/天,整片喂服,共兩天),隨后肝炎平治療組給予肝炎平1片/天,整片喂服,共6周。蘇木素-伊紅染色觀察肝組織病理改變;電鏡觀察肝組織超微病理改變;放射免疫法檢測血清透明質(zhì)酸(hyaluronic,HA)、Ⅳ型膠原(collagenⅣ,C-Ⅳ)、層黏蛋白(laminin,LN)、及Ⅲ型前膠原(precollagenⅢ,PCⅢ);免疫組織化學(xué)SP法檢測各組肝組織肝細胞生長
3、因子(hepatocytegrowthfactor,HGF)和轉(zhuǎn)化生長因子β1(transforminggrowthfactor-β1,TGF-β1)在肝組織中的定位,Westernblot和PT-PCR分別檢測蛋白和mRNA的表達水平。 結(jié)果:HE染色觀察到肝炎平治療組較模型組在匯管區(qū)血吸蟲蟲卵和纖維結(jié)締組織明顯減少,電鏡觀察到肝炎平治療組較模型組肝細胞腫脹明顯減輕,Diss間隙內(nèi)膠原沉積明顯好轉(zhuǎn);肝炎平治療組肝纖維各項指標(biāo)(
4、HV、C-Ⅳ、LN及PCⅢ)均低于模型組;模型組肝組織內(nèi)HGF的蛋白和mRNA表達降低,而TGF-β1的表達增強,肝炎平組HGF的表達較模型組增強,而TGF-β1的表達降低,二者差異顯著(P<0.05)。 討論:本研究結(jié)果表明,肝炎平具有減少膠原沉積、降低各項血清肝纖維化指標(biāo)的作用,其機制可能在于肝炎平促進血吸蟲性肝纖維化家兔肝組織HGF的表達,抑制TGF-β1的表達,進而改善細胞外基質(zhì)(extracellularmatrix,
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