化濁解毒法組方調(diào)節(jié)MCP-1和Il-13和抗DMN致實驗性肝纖維化的研究.pdf

1、目的:通過觀察以化濁解毒法組方對二甲基亞硝胺(DMN)致大鼠肝纖維化模型中肝組織Ⅰ型膠原蛋白(ColⅠ)、Ⅲ型膠原蛋白(ColⅢ)的表達，以及血清中單核細胞趨化蛋白1(MCP-1)和白細胞介素-13(IL-13)含量的影響，評價化濁解毒方對大鼠肝纖維化的調(diào)節(jié)作用，探討其可能的作用機制，為化濁解毒法治療肝纖維化提供進一步的實驗依據(jù)，從方證相關(guān)的角度，為以濁毒論治肝纖維化提供分子水平的依據(jù)。
　　 方法:清潔級SD雄性大鼠70只，體

2、重200g±20g，于購入并自適應喂養(yǎng)一周后隨機分為四組，即正常對照組，模型對照組，復方鱉甲軟肝片組，化濁解毒法組方高、中、低三個劑量組。除正常對照組外，其余各組大鼠均按每次10mg/kg于同一時刻給予腹腔注射1％DMN，以制備大鼠肝纖維化模型。第1周連續(xù)注射3天;第2到6周每周連續(xù)注射2天，共13次。在造模的第2、4周末分別處死模型組大鼠各4只，觀察肝組織病理切片纖維化程度。至第4周末，大鼠中度肝纖維化模型建立。于造模第5周開始，正常

3、對照組、模型對照組大鼠灌胃給予10ml/kg·d生理鹽水，其余各組大鼠按相應劑量進行等體積灌胃給藥，連續(xù)給藥至實驗結(jié)束。至第8周末，處死全部受試大鼠，取大鼠新鮮肝臟組織，運用RT-PCR法檢測肝臟組織中ColⅠ、ColⅢ的含量，運用ELISA法檢測大鼠血清中MCP-1、IL-13的含量。
　　 結(jié)果:
　　 1、各組大鼠的一般情況:正常對照組大鼠無死亡情況，模型對照組大鼠死亡3只，化濁解毒方高劑量組死亡2只。正常對照組大

4、鼠進食良好，毛色光澤，精神飽滿，體重有所增加，反應靈敏好動，大便呈顆粒狀。其余各組大鼠均有不同程度的進食減少，皮毛稀疏，精神萎靡不振，體重減輕，便溏等。給予化濁解毒方和復方鱉甲軟肝片以后，大鼠的一般情況均得到不同程度的改善。
　　 2、化濁解毒方對大鼠肝組織中ColⅠ水平的影響
　　 與正常對照組相比，模型對照組ColⅠ表達明顯增多，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.01）。與模型對照組相比，化濁解毒方中劑量組ColⅠ表達明顯降

5、低，差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.01);化濁解毒方低劑量、復方鱉甲軟肝片組ColⅠ表達降低，差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05);化濁解毒方高劑量組ColⅠ表達降低不明顯，差異無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)。
　　 3、化濁解毒方對大鼠肝組織中ColⅢ水平的影響
　　 與正常對照組相比，模型對照組ColⅢ表達明顯增多，差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.01)。與模型對照組相比，化濁解毒方中劑量組ColⅢ表達明顯降低，差異有統(tǒng)計學意義（P

6、＜0.01）;化濁解毒方低劑量、復方鱉甲軟肝片組ColⅢ表達降低，差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05);化濁解毒高劑量方組ColⅢ表達降低不明顯，差異無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)。
　　 4、化濁解毒方對大鼠血清中MCP-1水平的影響
　　 與正常對照組相比，模型對照組MCP-1表達明顯增多，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.01）;與模型對照組相比，除化濁解毒方高劑量組外（P＞0.05），各治療組MCP-1表達均明顯降低，差異有統(tǒng)

7、計學意義(P＜0.01);復方鱉甲軟肝片MCP-1表達較化濁解毒方高、低劑量組降低，差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.01，P＜0.05)。
　　 5、化濁解毒方對大鼠血清中IL-13水平的影響
　　 與正常對照組相比，模型對照組IL-13表達明顯增多，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.01）;與模型對照組相比，各給藥組大鼠血清IL-13表達均明顯降低，差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.01);復方鱉甲軟肝片IL-13表達較化濁解毒方高劑量組顯

8、著降低（P＜0.0.1）;化濁解毒方中劑量組IL-13表達與高、低劑量相比顯著降低，差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.01，P＜0.05)。
　　 結(jié)論:
　　 1、化濁解毒方能夠改善肝纖維化大鼠的一般情況。
　　 2、化濁解毒方可以不同程度的改善肝纖維化大鼠肝組織ColⅠ、ColⅢ的情況，以中劑量效果最為明顯。
　　 3、化濁解毒方可減少血清中細胞因子MCP-1及IL-13的表達，發(fā)揮抗肝纖維化的作用。