空腸彎曲菌體外非理想條件下性狀變化評(píng)估.pdf

1、目的:
　　 1.觀察空腸彎曲菌在不同氧含量條件下于哥倫比亞血瓊脂培養(yǎng)基、布氏肉湯培養(yǎng)基培養(yǎng)不同時(shí)間的形態(tài)變化;
　　 2.研究空腸彎曲菌在自然氧含量條件(21％ O2，78％ N2，1％ CO2)下于哥倫比亞血瓊脂培養(yǎng)基、布氏肉湯培養(yǎng)基培養(yǎng)培養(yǎng)條件下的生存能力。
　　 方法:
　　 1.將凍存的空腸彎曲菌菌株進(jìn)行復(fù)蘇及培養(yǎng);
　　 2.在微需氧條件(10％ CO2、5％ O2、85％N2)下培養(yǎng)

2、24小時(shí)后的空腸彎曲菌分別轉(zhuǎn)移到自然氧含量條件(21％O2，78％ N2，1％ CO2)下繼續(xù)培養(yǎng)和繼續(xù)微需氧條件下培養(yǎng);
　　 3.將自然氧含量條件下培養(yǎng)不同時(shí)間的空腸彎曲菌菌株重新接種于新的培養(yǎng)基培養(yǎng);
　　 4.分別于培養(yǎng)的不同時(shí)間進(jìn)行革蘭染色、掃描電鏡和透射電鏡觀察形態(tài);
　　 5.利用細(xì)菌濁度儀測(cè)定自然氧含量條件下不同時(shí)間的細(xì)菌濁度;
　　 6.VITEK2-compact全自動(dòng)微生物鑒定儀檢測(cè)

3、不同培養(yǎng)條件下的空腸彎曲菌。
　　 結(jié)果:
　　 1.掃描電鏡下觀察空腸彎曲菌在微需氧培養(yǎng)條件下培養(yǎng)24小時(shí)呈均勻的螺旋桿狀;轉(zhuǎn)移到自然氧含量條件下培養(yǎng)10小時(shí)后出現(xiàn)形態(tài)改變，即菌體縮短，一端皺縮變形，呈火柴頭狀;24小時(shí)后可見(jiàn)菌體折疊皺縮，呈不規(guī)則球狀、環(huán)狀、月牙狀。
　　 2.光學(xué)顯微鏡下觀察空腸彎曲菌在持續(xù)微需氧條件下培養(yǎng)34小時(shí)可見(jiàn)革蘭陰性球菌;自然氧含量條件下培養(yǎng)14小時(shí)可見(jiàn)革蘭陰性球菌，直至84小時(shí)仍

4、伴有桿狀菌體存在，此外還可見(jiàn)異常長(zhǎng)度的菌體。
　　 3.將發(fā)生形態(tài)變化的空腸彎曲菌重新接種回微需氧環(huán)境培養(yǎng)均可見(jiàn)生長(zhǎng)，掃描電鏡下可見(jiàn)不同形態(tài)的菌體，即不規(guī)則環(huán)狀、不規(guī)則球狀、短桿狀、細(xì)長(zhǎng)桿狀;光學(xué)顯微鏡下可見(jiàn)空腸彎曲菌由革蘭陰性球菌變化為革蘭陰性桿菌。
　　 4.透射電鏡下觀察空腸彎曲菌在微需氧條件下培養(yǎng)24小時(shí)結(jié)構(gòu)完整、對(duì)稱，細(xì)胞內(nèi)結(jié)構(gòu)密度均勻，分布均勻;自然氧含量條件下培養(yǎng)24小時(shí)可見(jiàn)結(jié)構(gòu)不對(duì)稱，細(xì)胞漿膜外周間隙增大

5、，密度不均勻，偶可見(jiàn)去壁細(xì)菌細(xì)胞和血影細(xì)胞。
　　 5.接種于哥倫比亞血瓊脂培養(yǎng)基的菌株持續(xù)自然氧含量條件下培養(yǎng)至22天，將其接種于哥倫比亞血瓊脂培養(yǎng)基回微需氧條件下仍可見(jiàn)菌株生長(zhǎng)。
　　 6.布氏肉湯培養(yǎng)基培養(yǎng)的空腸彎曲菌進(jìn)行革蘭染色均可見(jiàn)革蘭陰性桿菌，將其持續(xù)自然氧含量條件下培養(yǎng)至20天，重新接種于哥倫比亞血瓊脂培養(yǎng)基置于微需氧條件培養(yǎng)后可見(jiàn)生長(zhǎng)，接種于新的布氏肉湯培養(yǎng)基置于自然氧含量條件下培養(yǎng)也見(jiàn)生長(zhǎng)。
　　

6、 7.空腸彎曲菌在微需氧條件下培養(yǎng)24小時(shí)經(jīng)革蘭染色鑒定為革蘭陰性桿菌，再經(jīng)VITEK2-compact全自動(dòng)微生物鑒定儀鑒定為空腸彎曲菌;于自然氧含量條件下培養(yǎng)24小時(shí)經(jīng)革蘭染色鑒定為革蘭陰性球菌，經(jīng)VITEK-2生化測(cè)定鑒定為其他。
　　 結(jié)論:
　　 1.空腸彎曲菌在不同的培養(yǎng)條件下菌體形態(tài)發(fā)生變化;
　　 2.發(fā)生形態(tài)變化的菌體的內(nèi)部結(jié)構(gòu)及生化反應(yīng)的酶也會(huì)出現(xiàn)相應(yīng)的改變;
　　 3.空腸彎曲菌對(duì)