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1、目的:對(duì)廣西民族藥當(dāng)歸藤進(jìn)行化學(xué)成分研究,并對(duì)其進(jìn)行質(zhì)量分析、急性毒性試驗(yàn)和抗凝血實(shí)驗(yàn)研究,為更好地開(kāi)發(fā)和利用當(dāng)歸藤藥材資源做好前期準(zhǔn)備,為后續(xù)的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)、制劑、臨床等研究工作提供科學(xué)依據(jù)。
方法:化學(xué)成分研究方面:首先對(duì)當(dāng)歸藤進(jìn)行化學(xué)成分預(yù)試,然后采用系統(tǒng)溶劑提取分離法得到不同極性的當(dāng)歸藤提取部位,再用硅膠柱層析分離法對(duì)石油醚部位和乙酸乙酯部位進(jìn)行分離純化,得到的單體運(yùn)用MS、1H-NMR和13C-NMR等技術(shù)進(jìn)行結(jié)構(gòu)鑒定。
2、此外,還對(duì)當(dāng)歸藤不同部位進(jìn)行揮發(fā)油成分GC-MS分析;質(zhì)量分析方面:首先對(duì)當(dāng)歸藤進(jìn)行顯微鑒定,然后用UV-Vis法測(cè)定其總黃酮含量,并用正交設(shè)計(jì)優(yōu)選最佳提取工藝,再用HPLC法測(cè)定其兒茶素含量;藥效篩選方面:對(duì)當(dāng)歸藤進(jìn)行急性毒性試驗(yàn)及抗凝血實(shí)驗(yàn)研究。
結(jié)果:化學(xué)成分研究方面:化學(xué)預(yù)試驗(yàn)結(jié)果表明當(dāng)歸藤中可能含有糖類、苷類、酚類、鞣質(zhì)、皂苷、有機(jī)酸類、黃酮類、三萜類、甾體類、揮發(fā)油及油脂等成分。從石油醚部位和乙酸乙酯部位分離純化得
3、到7個(gè)單體,鑒定了其中5個(gè)化合物的結(jié)構(gòu),分別是:2-二十七烷酮、十五烷酸-十五烷酯、β-谷甾醇、4-正癸基苯甲酸、豆甾醇。從當(dāng)歸藤根、莖、葉揮發(fā)油中分別鑒定出11、36、74個(gè)成分,分別占揮發(fā)油總量的77.67%、92.88%和85.11%;質(zhì)量分析方面:當(dāng)歸藤有顯著的顯微特征,根的皮層有單個(gè)石細(xì)胞散在,在中柱部位有較多石細(xì)胞群及纖維束散在并斷續(xù)成環(huán)。莖的韌皮部寬廣,在靠近形成層部位有大型的分泌細(xì)胞散在,在射線部位有石細(xì)胞群。當(dāng)歸藤的薄
4、層色譜中,兒茶素斑點(diǎn)清晰,在與對(duì)照藥材色譜圖相應(yīng)位臵上顯相同顏色的斑點(diǎn)。當(dāng)歸藤總黃酮最佳提取工藝為50%乙醇100ml加熱回流提取2h,并測(cè)得總黃酮平均含量為11.77%。HPLC法測(cè)定當(dāng)歸藤中兒茶素的含量最佳色譜條件為檢測(cè)波長(zhǎng)280nm、流動(dòng)相甲醇-0.5%冰乙酸(15∶85)、流速為0.80ml/min,結(jié)果表明兒茶素峰面積在進(jìn)樣量為0.26μg~1.35μg之間呈良好的線性關(guān)系y=1118x+4.663,r=0.9997,平均加樣
5、回收率為98.26%,RSD為2.7%,其中廣西金秀產(chǎn)含量最高;藥效篩選方面:當(dāng)歸藤水提取物和醇提取物的毒性都很小,最大耐受量倍數(shù)相當(dāng)成人用量的150倍。醇提取物低劑量有抗凝血作用。結(jié)論:本研究首次從當(dāng)歸藤中分離得到2-二十七烷酮、十五烷酸-十五烷酯、β-谷甾醇、4-正癸基苯甲酸、豆甾醇等化合物,并首次對(duì)當(dāng)歸藤不同部位進(jìn)行揮發(fā)油成分GC-MS分析,為闡明當(dāng)歸藤藥理作用提供物質(zhì)基礎(chǔ)。首次對(duì)當(dāng)歸藤藥材進(jìn)行了生藥學(xué)和TLC鑒別研究,結(jié)果可作為
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