高IgM綜合征臨床與分子特征研究.pdf

1、目的:分析和探討本組HIGM患兒的臨床及實驗室檢查特征;基因分析診斷X-HIGM患者及發(fā)現(xiàn)攜帶者;指導(dǎo)臨床治療并進(jìn)行產(chǎn)前診斷等相關(guān)遺傳咨詢;分析HIGM患兒外周血中Treg、 Th17、Th1細(xì)胞百分率情況及其與自身免疫發(fā)生的相關(guān)性。
　　方法:對2011年11月～2013年3月在重慶醫(yī)科大學(xué)附屬兒童醫(yī)院就診或外院寄血標(biāo)本的10例疑診HIGM患兒臨床資料進(jìn)行總結(jié)分析。收集患兒及相關(guān)親屬外周靜脈血，采用流式細(xì)胞術(shù)檢測患兒外周血PBM

2、C中CD40L及CD40蛋白表達(dá)，對患兒CD40L、AID、UNG、CD40、NEMO等基因進(jìn)行PCR擴(kuò)增、基因測序及家系分析。采用DNA-PCR直接測序法分析X-HIGM攜帶者胎兒羊水細(xì)胞CD40L基因，進(jìn)行產(chǎn)前基因診斷。流式細(xì)胞術(shù)檢測CD40L基因突變患兒外周血Treg、Th17、Th1細(xì)胞百分率情況。
　　結(jié)果:本組10例疑診HIGM患兒平均起病年齡7.8±6.6月，平均診斷年齡4.6±2.2歲。所有患兒均有反復(fù)感染表現(xiàn)，主

3、要為反復(fù)肺炎(100％)，中耳炎(80％)，反復(fù)腹瀉(60％)，淋巴結(jié)結(jié)核(50％)，反復(fù)口腔潰瘍(40％)，鵝口瘡(30％)。此外，部分出現(xiàn)間歇性關(guān)節(jié)痛(30％)，營養(yǎng)不良(20％)，肝功能異常(20％)，肝臟腫大(20％)，便血及貧血(20％)等表現(xiàn)。本組患兒中8例表現(xiàn)為典型的IgG、IgA降低，IgM增高或正常;P3患兒IgA水平反而增高; P5患兒IgA及IgM水平均正常，IgG降低。8例患兒應(yīng)用流式細(xì)胞術(shù)檢測CD40L蛋白表達(dá)

4、，除P9部分表達(dá)外其余均表達(dá)缺失?；蚍治霭l(fā)現(xiàn)7例患兒存在6種不同的CD40L基因突變，其中包括2種新型突變(400delA，89delT)。突變類型包括缺失突變5例，無義突變1例，錯義突變1例。并確定3例患兒母親為致病基因攜帶者。3例患兒暫時未發(fā)現(xiàn)HIGM相關(guān)基因突變;其中P7患兒FCM檢測CD40L蛋白表達(dá)缺失，cDNA無表達(dá)，但DNA水平未發(fā)現(xiàn)突變。分析2例X-HIGM攜帶者的胎兒均存在與前期診斷患兒相同的CD40L基因突變。同時

5、發(fā)現(xiàn)HIGM患兒外周血中CD4+CD25+FoxP3+Treg細(xì)胞百分率較正常對照明顯降低(1.648±0.577％N=6 VS3.895±1.570％N=6，P=0.015);Th17細(xì)胞百分率呈上升趨勢，但無統(tǒng)計學(xué)意義(2.217±1.209％N=6 VS0.983±0.714％N=6，P=0.057);Th1細(xì)胞百分率較正常對照明顯升高(35.100±14.564％N=6 VS13.000±7.618％N=6, P=0.008)。

6、
　　結(jié)論:通過對10例中國疑診HIGM患兒臨床及分子特點進(jìn)行分析，發(fā)現(xiàn)本組HIGM患兒起病早，病情重，表現(xiàn)復(fù)雜。基因分析發(fā)現(xiàn)7例患兒存在CD40L基因突變，其中2例為新型突變。FCM檢測CD40L蛋白可快速、高效診斷本病，基因分析有助于本病的確診、發(fā)現(xiàn)攜帶者和進(jìn)行遺傳咨詢，對HIGM患兒早期診斷、正規(guī)治療、造血干細(xì)胞移植根治該病具有重要作用。HIGM患者外周血中CD4+CD25+FoxP3+調(diào)節(jié)性T細(xì)胞百分率降低及Th17、Th