HTERT、C-myc、Ki-67在肝癌組織中的表達(dá)規(guī)律及意義.pdf

1、目的：原發(fā)性肝癌(PHC,簡稱肝癌)早期缺乏特異性診斷手段，臨床發(fā)現(xiàn)多是中晚期病例。PHC生物學(xué)行為惡劣，自然病程進(jìn)展快，目前治療手段效果極其悲觀。隨著免疫學(xué)和分子生物學(xué)的快速進(jìn)展，利用現(xiàn)代科技手段闡述PHC的發(fā)生、發(fā)展規(guī)律，為攻克PHC展示了美好的前景。人端粒酶逆轉(zhuǎn)錄酶(HTERT)在腫瘤診斷及治療中的研究已經(jīng)取得了一定的進(jìn)展，大多數(shù)人類惡性腫瘤細(xì)胞存在HTERT活性，HTERT已被認(rèn)為是惡性腫瘤診斷和治療的相關(guān)靶點(diǎn)。C-myc蛋白是

2、由myc原癌基因編碼，參與細(xì)胞的分化與增殖，其調(diào)控表達(dá)異常與腫瘤發(fā)生密切相關(guān)。增殖細(xì)胞核抗原Ki-67表達(dá)于增殖狀態(tài)的細(xì)胞核基質(zhì)中，和細(xì)胞的增殖與腫瘤的發(fā)生、浸潤、轉(zhuǎn)移等密切相關(guān)。大量研究表明，HTERT、C-myc、Ki-67均與惡性腫瘤有關(guān)，但在PHC組織中，三個因子同步測定的實(shí)驗(yàn)未見報(bào)道。本課題通過同步檢測人PHC組織中三者的表達(dá)規(guī)律，探討三者在PHC的發(fā)生、發(fā)展以及生物學(xué)行為中的作用。 方法：收集近兩年來有明確病理診斷的

3、37例PHC存檔蠟塊，5例正常肝組織(取自尸檢)，請病理學(xué)副主任醫(yī)師重新作出病理診斷(肝細(xì)胞肝癌35例、肝內(nèi)膽管細(xì)胞性肝癌1例、混合性肝癌1例)，并按WHO分級標(biāo)準(zhǔn)分級：高分化(1級)5例、中分化(2級)17例、低分化(3級)15例。按福州邁新公司推薦的快速免疫組化法，采用即用型快速免疫組化MaxVision試劑盒、兔抗人HTERT多克隆抗體、鼠抗人C-myc單克隆抗體、鼠抗人Ki-67單克隆抗體對所有標(biāo)本行免疫組化檢測。表達(dá)強(qiáng)度根據(jù)染

4、色深淺和陽性細(xì)胞比例分為陰性、弱陽性、中度陽性、強(qiáng)陽性4級。使用SAS6.12軟件，分析HTERT、C-myc、Ki-67與PHC臨床病理特征的關(guān)系以及三個因子之間的相互關(guān)系。 結(jié)論： 1.HTERT 在 PHC 中具有高度敏感性，其表達(dá)程度和PHC的分化有關(guān)，細(xì)胞分化越差，表達(dá)越強(qiáng)，提示利用HTERT的測定，有助于肝癌的診斷和預(yù)后分析。 2.C-myc基因參與了PHC的發(fā)生階段，并在癌變后繼續(xù)發(fā)揮作用，是 P

5、HC 浸潤、復(fù)發(fā)及預(yù)后等生物學(xué)行為的影響因素。 3.Ki-67是反映 PHC 細(xì)胞增殖的良好指標(biāo)，其在PHC的浸潤及轉(zhuǎn)移等行為中可能起到關(guān)鍵性作用。檢測Ki-67的表達(dá)，是臨床對 PHC 進(jìn)行診斷、病理分期、判斷預(yù)后一種方法。 4.HTERT和C-mvc對PHC細(xì)胞的生物學(xué)影響是獨(dú)立的。HTERT的生物調(diào)控可能是多因素共同作用。 5.實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)PHC中，HTERT的表達(dá)和Ki-67表達(dá)有關(guān)，其強(qiáng)度分布隨 PHC

6、 病理分級增加而加大。提示深入研究HTERT 和 Ki-67的內(nèi)在聯(lián)系，為PHC的基因治療提供依據(jù)。 6.PHC中C-myc和Ki-67有密切關(guān)系，聯(lián)合檢測有助于PHC的診斷和判斷預(yù)后。 7.利用PHC存檔蠟塊成功檢測了HTERT、C-myc、Ki-67的表達(dá)情況，有利于對PHC進(jìn)行回顧性分析研究。 8.文獻(xiàn)中未見免疫組化技術(shù)同步檢測PHC存檔蠟塊中HTERT、C-myc、Ki-67的表達(dá)，本課題成果證明，這是