antagomiR-103與阿霉素作用于TGF-β1誘導的HepG2細胞對其EMT及細胞存活率的影響.pdf

1、《中國圖書資料分類法》分類號：R737.9單位代碼：10660學號：S110063貴陽醫(yī)學院貴陽醫(yī)學院20142014屆碩士學位論文屆碩士學位論文antagomiR103與阿霉素作用于與阿霉素作用于TGFTGFβ1誘導的導的HepG2HepG2細胞對其細胞對其EMTEMT及細胞存活率的及細胞存活率的影響影響研究生：王金利導師：沈祥春教授張敏副教授年級：2011級專業(yè)：藥理學2014年4月15日antagomiR103與阿霉素阿霉素聯(lián)合作

2、用于聯(lián)合作用于TGFTGFβ1誘導的誘導的HepG2HepG2細胞細胞對其EMTEMT及細胞存活率的影響細胞存活率的影響專業(yè)名稱：藥理學研究生：王金利導師：沈祥春張敏摘要摘要：目的探討antagomiR103對TGFβ1誘導肝癌細胞（HepG2）發(fā)生上皮間質(zhì)細胞轉化（EMT）的影響；阿霉素（ADM）對TGFβ1誘導發(fā)生EMT的HepG2細胞存活率的影響；antagomiR103與ADM聯(lián)合用藥對TGFβ1誘導發(fā)生EMT的HepG2細胞存

3、活率的影響。方法（1）HepG2細胞體外培養(yǎng)，通過光學倒置顯微鏡觀察對照組、TGFβ1組細胞形態(tài)的變化使用蛋白質(zhì)免疫印記法（westernblot）檢測兩組細胞中ECadherin、NCadherin、Vimentin的表達變化；（2）使用劃痕實驗檢測TGFβ1、antagomiR103對HepG2細胞遷移能力的影響、antagomiR103對TGFβ1誘導發(fā)生EMT的HepG2細胞遷移能力的影響；（3）使用westernblot檢測各

4、處理組細胞中ECadherin、NCadherin、Vimentin的表達變化；（4）應用MTT法檢測ADM組、TGF1ADM組、ADMantagomiR103組、ADMantagomiR103TGFβ1組HepG2細胞的存活率，根據(jù)公式計算并比較ADM的IC50。結果（1）在相同時段，與control組、antagomiR103組相比較，TGFβ1促進HepG2細胞遷移，24h、48h、72h遷移率分別為(52.336.658)%、（

5、87.335.033）%、（97.002.646）%，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）；（2）在相同時段，與control組、TGFβ1組相比較，antagomiR103抑制HepG2細胞遷移，24h、48h、72h遷移率分別為（9.8330.7638）%、（13.001.114）%、（10.831.041）%，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）；(3)在相同時段，與control組、TGFβ1組相比較，antagomiR103抑制TGF

6、β1誘導發(fā)生EMT的HepG2細胞遷移，24h、48h、72h遷移率分別為（21.672.887）%，（31.005.292）%，（41.006.557）%，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）；（4）TGFβ1使ECadherin表達下調(diào)，NCadherin表達上調(diào)，Vimentin表達上調(diào)（P＜0.05）（5）antagomiR103使ECadherin表達上調(diào)，NCadherin表達下調(diào)，Vimentin表達下調(diào)（P＜0.05）；（6

7、）ADM作用于HepG2細胞，ADM半數(shù)抑制濃度（IC50）為6.699mgL；ADM作用于TGFβ1誘導發(fā)生EMT的HepG2細胞，ADM的IC50為8.698mgL；ADM與antagomiR103共同作用于HepG2細胞，ADM的IC50為3.826mgL；ADM與antagomiR103共同作用于TGFβ1誘導發(fā)生EMT的HepG2細胞，ADM的IC50為3.913mgL。（7）隨著ADM濃度的增高，細胞存活率逐漸降低。ADM濃

8、度相同時不同藥物組之間比較，當ADM濃度為25mgL時，antagomiR103ADM組的細胞存活率明顯低于其他藥物組（P＜0.01）。結論（1）antagomiR103抑制HepG2細胞發(fā)生遷移，對TGFβ1誘導發(fā)生EMT的HepG2細胞的遷移能力也有抑制作用；（2）antagomiR103抑制HepG2細胞發(fā)生EMT；（3）antagomiR103與ADM聯(lián)合用藥對TGFβ1誘導HepG2細胞發(fā)生EMT的能力有抑制作用；（4）ant