2型糖尿病腎病患者血小板CD62p、PAC-1的表達(dá).pdf

1、目的：
　　 觀察2型糖尿病及糖尿病腎病患者血小板活化標(biāo)記物CD62p、PAC-1的表達(dá)，及其與尿微量白蛋白排泄率的關(guān)系，探討血小板膜糖蛋白PAC-1及顆粒膜蛋白CD62p活化百分比在糖尿病腎病發(fā)病機(jī)制中的作用，為糖尿病腎病診斷、研究病情進(jìn)展及抗血小板治療、療效觀察提供指導(dǎo)。
　　 方法：
　　 將50例健康體檢者作為對(duì)照組（NC），54例2型糖尿病無(wú)腎臟并發(fā)癥患者作為糖尿病組（DM），50例2型糖尿病腎病患者為

2、糖尿病腎病組（DN），三組年齡、體重指數(shù)相匹配。再根據(jù)尿微量白蛋白排泄率將糖尿病腎病組分為糖尿病腎病微量白蛋白尿組（DN1）和糖尿病腎病大量白蛋白尿組（DN2）兩個(gè)亞組。入選病例均化驗(yàn)空腹（FPG）及早餐后2小時(shí)血糖（2hPG）、糖化血紅蛋白（HbA1C）、低密度脂蛋白膽固醇（LDL-C）、高密度脂蛋白膽固醇（HDL-C）、甘油三酯（TG）、總膽固醇（TC）、尿微量白蛋白排泄率（UAER），并記錄收縮壓（SBP）、舒張壓（DBP）。所有

3、病例空腹早8：00用3.8％枸櫞酸鈉抗凝的真空采血管采集靜脈血2ml，樣本采集不扎止血帶，棄去前2ml混有組織液的血液，直立樣本管，避免混搖振蕩，立即送實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)血小板CD62p、PAC-1。
　　 試驗(yàn)管中加入全血樣本5μl，再加入CD61 PerCP、CD62pPE、PAC-1 FITC各10μl。對(duì)照管中加入全血樣本5μl，再加入CD61 PerCP、RGDS、Mouse gl PE各10μl，分別輕搖混勻，室溫避光孵育1

4、0-15分鐘后，均加入PBE磷酸鹽緩沖液0.5ml稀釋?zhuān)纯逃昧魇郊?xì)胞儀（FCM）上機(jī)檢測(cè)。上機(jī)時(shí)先根據(jù)前向角和側(cè)向角散射光信號(hào)設(shè)定血小板門(mén)，排除各種血小板聚集體，通過(guò)CD61PerCP標(biāo)記確認(rèn)血小板，每個(gè)樣本測(cè)10000個(gè)血小板。
　　 所有數(shù)據(jù)采用SPSS10.0軟件進(jìn)行單因素方差分析，LSD、Duncan多重比較及Spearman等級(jí)相關(guān)分析，結(jié)果用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（mean±SD）表示。
　　 結(jié)果：
　　

5、1、2型糖尿病無(wú)腎臟并發(fā)癥組與糖尿病腎病組臨床資料比較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。
　　 2、DM組、DN1組、DN2組UAER分別為17.06±3.98μg/min、96.54±10.37μg/min、537.31±55.00μg/min明顯高于NC組（10.03±3.02μg/min），有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01），DN1組、DN2組UAER明顯高于DM組（P<0.01），DN2組UAER明顯高于DN1組（P<0.01）。
　　

6、3、2型糖尿病腎病組血小板CD62p、PAC-1及兩者同時(shí)表達(dá)的陽(yáng)性率分別為16.31±1.27％、7.97±1.15％、28.40±3.23％，與2型糖尿病組（9.73±1.75％、2.83±0.62％、10.91±1.83％）比較顯著升高（P<0.01），兩組與正常健康對(duì)照組（3.22±0.65％、0.48±0.06％、4.96±1.03％）比較顯著升高（P<0.01）。
　　 4、DN1組血小板CD62p、PAC-1及兩者

7、同時(shí)表達(dá)的陽(yáng)性率分別為14.55±1.41％、8.46±1.48％、29.15±4.17％，與DN2組（分別為18.43±2.33％、7.10±1.91％、27.07±5.29％）比較無(wú)差異。
　　 5、相關(guān)分析顯示UAER與CD62p正相關(guān)（r=0.28，P<0.05），與CD62p+PAC-1呈顯著正相關(guān)（r=0.377，P<0.01），與PAC-1無(wú)關(guān)（r=0.051）。
　　 6、血小板活化與臨床資料的相關(guān)性分析

8、顯示，CD62p與DBP正相關(guān)（r=0.234，p<0.05），與LDL-C顯著正相關(guān)（r=0.269，p<0.01）；PAC-1與糖尿病病程正相關(guān)（r=0.296，p<0.05），與DBP正相關(guān)（r=0.247，p<0.05），與TC正相關(guān)（r=0.246，p<0.05）；CD62p與PAC-1均表達(dá)與DBP顯著正相關(guān)（r=0.340，p<0.01）；與LDL-C顯著正相關(guān)（r=0.335，p<0.01）。
　　 結(jié)論：

9、>　　 1、2型糖尿病患者血小板活化標(biāo)志物CD62p、PAC-1表達(dá)明顯高于正常對(duì)照。
　　 2、糖尿病腎病患者血小板膜糖蛋白PAC-1及CD62p表達(dá)陽(yáng)性百分率均高于糖尿病無(wú)腎臟并發(fā)癥患者。
　　 3、糖尿病腎病大量尿白蛋白患者與微量白蛋白尿患者CD62p、PAC-1表達(dá)陽(yáng)性率無(wú)差異。
　　 4、糖尿病腎病尿微量白蛋白排泄率與CD62p、CD62p與PAC-1同時(shí)表達(dá)陽(yáng)性率呈正相關(guān)，與PAC-1無(wú)關(guān)，檢測(cè)CD

10、62p或CD62p、PAC-1同時(shí)表達(dá)的血小板可作為糖尿病腎病臨床診斷的輔助指標(biāo)，并監(jiān)測(cè)病情進(jìn)展。
　　 5、檢測(cè)CD62p、PAC-1同時(shí)表達(dá)陽(yáng)性率對(duì)糖尿病腎病發(fā)生、進(jìn)展監(jiān)測(cè)優(yōu)于單獨(dú)檢測(cè)CD62p。
　　 6、低密度脂蛋白膽固醇、舒張壓的異常與血小板活化相關(guān)。
　　 總之，血小板膜糖蛋白PAC-1和顆粒膜蛋白CD62p活化表達(dá)的陽(yáng)性百分比，反映了2型糖尿病、糖尿病腎病患者血小板活化狀態(tài)，與尿微量白蛋白排泄率呈正