犬抗細(xì)粒棘球絳蟲保護(hù)性抗原EgM9重組蛋白引起免疫應(yīng)答變化規(guī)律的研究.pdf

1、包蟲病是由棘球?qū)僦薪{期引起的重要人畜共患寄生蟲病，呈世界范圍流行，導(dǎo)致了全球性的公共衛(wèi)生和經(jīng)濟(jì)問題。犬是包蟲病最主要的終末宿主，在傳播包蟲病的過程中起關(guān)鍵作用，所以對終末宿主一家、牧犬防治是控制包蟲病流行的關(guān)鍵，若能對終末宿主實(shí)施疫苗預(yù)防，就可直接阻止蟲卵的傳播，控制傳染原，保護(hù)中間宿主避免感染包蟲病。因此在切斷包蟲病循環(huán)鏈過程中，通過對犬進(jìn)行免疫預(yù)防是完全有效的途徑。 Zhang等利用mRNA的差異顯示法(DDRT-PCR)檢

2、測細(xì)粒棘球絳蟲成熟蟲體與非成熟蟲體蛋白基因表達(dá)差異，篩選出了成熟蟲體的特異性基因片段即EgM家族片段，在大腸桿菌中高效表達(dá)其中的EgM9重組蛋白，并純化。 本實(shí)驗(yàn)針對EgM9重組蛋白輔以佐劑QuilA免疫犬后，用ELISA的方法檢測抗體和Real-Time PCR的方法檢測細(xì)胞因子。 ELISA檢測到抗體水平明顯升高，而且其主要抗體IgG及其亞類在免疫組和對照組之間存在明顯的差異，Real-Time PCR檢測到細(xì)胞因子

3、表達(dá)水平IFN吖是0周的1000倍以上，IL-4也有近20倍的增加。此實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，EgM9重組蛋白免疫犬后Thl和Th2明顯上升，能激起機(jī)體很強(qiáng)的體液和細(xì)胞免疫。 在原頭節(jié)攻擊實(shí)驗(yàn)犬45天后，剖檢實(shí)驗(yàn)犬發(fā)現(xiàn)，免疫組平均荷蟲數(shù)為7573條，只占到感染原頭節(jié)總數(shù)(轉(zhuǎn)化率)的3.79﹪，成熟的脫落孕節(jié)有3060條，只占到感染原頭節(jié)總數(shù)的1.5﹪；而對照組平均荷蟲數(shù)達(dá)到57080條，達(dá)到感染原頭節(jié)總數(shù)的28.5﹪，并且成熟的脫落孕節(jié)有