常規(guī)與近端開放輸精管結扎對兔睪丸和附睪結構的影響.pdf

1、研究背景與目的： 輸精管結扎術是目前最有效和廣泛開展的男性節(jié)育方法，常規(guī)輸精管結扎和近端開放輸精管結扎是其兩種主要的手術方式。輸精管結扎對睪丸精子發(fā)生和附睪結構的影響仍不完全清楚，而它可能影響輸精管吻合術后生育能力的恢復或輸精管結扎后進行人工受精的成功率。我們前期的研究顯示，兔輸精管結扎損害了精子發(fā)生，最嚴重的損害發(fā)生在術后lO天所有輸精管結扎側的睪丸，術后6月和12月對約一半動物的精子發(fā)生有顯著影響。但這種損害是由于輸精管的阻

2、塞還是手術創(chuàng)傷引起的并不清楚。本實驗對比研究雙側常規(guī)輸精管結扎和雙側近端開放輸精管結扎10天和3月對睪丸和附睪的組織學影響，以進一步探討手術創(chuàng)傷是否影響結扎術后并發(fā)癥以及近端開放輸精管結扎是否可緩解結扎術后并發(fā)癥。 方法： 1．正常雄性新西蘭大耳白兔(4～5月齡)50只，隨機分為4組：雙側常規(guī)輸精管結扎組(BCV)——暴露雙側睪丸和輸精管，切除一段輸精管并結扎兩側斷端；雙側近端開放輸精管結扎組(BOEV)——暴露和切除輸

3、精管同BCV，附睪側輸精管斷端保持開放，只結扎另一側輸精管；雙側對照手術組(BCO)——同BCV那樣暴露輸精管后，不切斷也不結扎輸精管；雙側假手術(BSO)——只作一皮下切口。BCO組6只動物，其余每組13～15只動物。 2．手術后10天4個組的動物(每組6只)以及手術后3月BCV組、BOEV組和BSO組的剩余動物，經Bouin液灌注固定后取材。BSO組隨機取單側睪丸和附睪，其他組取雙側睪丸和附睪。 3．用羥乙基甲基丙烯

4、酸樹脂包埋睪丸及附睪的組織塊，切10μm厚的樹脂切片，用PAS和蘇木精(睪丸)或單獨用蘇木精(附睪)染色。 4．光鏡下定性觀察睪丸和附睪的結構。 5．用體視學方法測量生精小管和附睪管的體積以及生精小管的直徑和長度。 結果： 1．BSO組睪丸和附睪形態(tài)正常，與周圍組織無粘連。BCV、BOEV和BCO組的睪丸和附睪均與周圍組織有不同程度的粘連，常扭曲變形，有的明顯變小。 2．術后10天，觀察到精子發(fā)生

5、被明顯損害的睪丸數在各組分別為2／11(BCO組，即該組觀察的11個睪丸中有2個出現了精子發(fā)生的明顯損害)、4／12(BCV)、12／12(BOEV)和0／6(BSO)，其中BOEV組的損害最嚴重。術后3月，觀察到精子發(fā)生被明顯損害的睪丸數在各組分別為9／14(BCV)、9／13(BOEV)和1／9(BSO)。3月BCV組比10天BCV組有更多的睪丸有精子發(fā)生損害，且損害更嚴重。與10天BOEV組相比，3月BOEV組精子發(fā)生的損害在4／

6、13的睪丸有所恢復，而在9／13的睪丸沒有改善或有更嚴重的損害。 3．精子發(fā)生損害的主要特征是：生精細胞(尤其是生精上皮淺層或腔面的生精細胞)脫落、疏松，數量減少；生精小管直徑顯著變小；生精細胞退化和多核細胞形成。在術后10天，BSO、BCO、BCV和BOEV組的睪丸體積(cm3，mean±SEM)和生精小管直徑(μm，mean±SEM)分別是2．14±0．23、1．74±0．09、1．57±O．14、1．15±0．07和181

7、±10、186±6、169±8、130±4。在術后3月，BSO、BCV和BOEV組的睪丸體積和生精小管直徑分別是2．454±0．10、1．674±0．24、1．334±0．18和199±6、1584±10、151±11。 4．術后10天，BCV組的附睪形態(tài)定量參數無顯著性改變。但BOEV組的附睪頭部萎縮，附睪頭部體積和頭部小管體積顯著減少到BSO組的57．4％和36．6％。 5．術后3月，BCV組和BOEV組均出現附睪尾

8、部精子郁積和附睪管擴張。BSO、BCV和BOEV組的附睪尾部體積(mm3，mean±SEM)和尾部附睪管體積(mm3，mean±SEM)分別是5574±30、8324±96、936±65和259±36、566±82、561±68。BCV組和BOEV組附睪頭部萎縮，附睪頭部和頭部小管體積顯著減少到BSO組的63．9％和67．9％。兩組均沒有附睪精子肉芽腫形成。 結論： 1．輸精管結扎后短期內對精子發(fā)生的損害可能主要是手術創(chuàng)

9、傷和炎性刺激所致，而長期結扎對精子發(fā)生的影響可能主要是輸精管結扎本身的作用。輸精管結扎對附睪的主要影響是附睪尾部精子郁積，附睪管擴張。 2．開放性結扎并未減輕輸精管結扎對精子發(fā)生的損害，也未減輕附睪的精子郁積，事實上開放性結扎術后10天對精子發(fā)生的損害更大。這提示，開放性結扎術后短期內可能由于精子溢出引起的刺激——炎性刺激或免疫反應而加重了對精子發(fā)生的影響，而以后可能由于輸精管開放端封閉(由于周圍組織粘連或斷端自行愈合)，其對精