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文檔簡介
1、隨著新型醫(yī)用鈦合金植入材料不斷應(yīng)用于臨床,解決了以往許多難以解決的問題,特別在骨科領(lǐng)域中,作為骨內(nèi)植入體和硬組織修復(fù)材料的醫(yī)用鈦合金植入材料得到了廣泛的臨床應(yīng)用。但是對于生物有機體而言,醫(yī)用金屬植入材料畢竟還是異物,其在物理和化學(xué)性能方面與體內(nèi)環(huán)境還存在著巨大的區(qū)別。在現(xiàn)實的骨科臨床應(yīng)用中,這種金屬材料自身性質(zhì)的差異往往會帶來很嚴(yán)重的問題。為了解決這些問題,人們開始著手研究如何提高醫(yī)用鈦合金植入材料的生物相容性,使植入體能夠與周圍的骨組
2、織形成穩(wěn)定的生物結(jié)合,保證植入體的近、遠期效果。
對于骨科而言,我們所關(guān)心的植入金屬材料生物相容性主要包括:材料與宿主之間的生物力學(xué)、物理化學(xué)方面的相互作用。表現(xiàn)為材料與宿主直接或間接接觸時涉及組織接受與定向結(jié)合、應(yīng)力傳遞與分布、材料表面生物學(xué)行為等等一系列生物學(xué)行為。對于骨科而言,我們最關(guān)心材料的力學(xué)特性和表面特性。因此,本研究擬從改善鈦合金植入材料力學(xué)特性以及表面特性兩方面入手,提高材料的生物相容性,并通過動物體內(nèi)實驗的方
3、法檢測其對于成骨的影響,以驗證其生物相容性改善的情況。
對于材料力學(xué)特性的改善,我們選用新近研制具有國家自主知識產(chǎn)權(quán)的新型超低彈性模量鈦合金Ti-24Nb-4Zr-7.9Sn,其彈性模量僅為33GPa[1]。因為根據(jù)以往的相關(guān)研究結(jié)果,彈性模量是決定金屬植入材料骨組織內(nèi)應(yīng)力是否集中的重要參數(shù),理論上,彈性模量越低、越接近骨,引起應(yīng)力吸收的幾率就越小,不良并發(fā)癥發(fā)生的機率也就越小。在材料表面改性方面,我們選用50μm溝槽的規(guī)則微
4、形態(tài)表面。在本課題組前期進行的動物體外實驗中,我們對照觀察了多種微形態(tài)表面上成骨細胞的生長情況。結(jié)果發(fā)現(xiàn),50μm溝槽的規(guī)則微形態(tài)表面的細胞在生長、分化等方面均具有優(yōu)勢,所以同時作為前期體外實驗的體內(nèi)驗證性研究,我們在表面處理上選擇50μm規(guī)則微形態(tài)。
1.低彈性模量鈦合金髓內(nèi)針對兔脛骨骨折愈合及脛骨髓腔內(nèi)成骨的影響
目的:為了檢驗低彈性模量金屬植入材料對于成骨的影響,我們選擇Ti-24Nb-4Zr-7.9Sn作為實
5、驗對象,選擇目前臨床最常用的鈦合金Ti-6Al-4V作為對照,在兔脛骨骨折髓內(nèi)針內(nèi)固定模型中,檢驗這兩種合金材料對于髓內(nèi)針周圍成骨及骨折愈合的影響。方法:實驗選用新西蘭大白兔15只,將Ti-24Nb-4Zr-7.9Sn(wt%)和Ti-6Al-4V(wt%)兩種鈦合金材料采用鑄造和機械加工的方法制成直徑為2mm、長度為85mm的圓棒,作為實驗用的髓內(nèi)針。脛骨做橫行截骨后打入髓內(nèi)針至脛骨骨髓腔以固定骨折,15只動物手術(shù)后均觀察4周。術(shù)后當(dāng)
6、日及術(shù)后各周拍脛骨正側(cè)位片,以確定內(nèi)固定位置。手術(shù)后4周時,處死15只動物,隨機選擇5只做生物力學(xué)實驗,5只拔除髓內(nèi)針后做Micro-CT實驗,5只帶髓內(nèi)針做病理學(xué)組織學(xué)觀察。其中生物力學(xué)實驗檢測髓內(nèi)針拔出力與骨折處骨痂的最大牽拉力,單位均為牛頓(N);Micro-CT實驗測量脛骨遠端髓內(nèi)針周圍的骨密度和骨痂體積比;組織病理切片使用MMA硬組織包埋,硬組織切片,HE染色和三色染色,并進行計算機輔助的圖像分析計算骨痂面積比。數(shù)據(jù)統(tǒng)計采用S
7、PSS12.0進行雙尾配對t檢驗,P值取0.05。結(jié)果:X線片示各只動物的骨折對位、內(nèi)固定位置均良好,骨折線隨時間變得逐漸模糊,骨痂量隨時間增加,基本在第三周就已經(jīng)有較明顯骨痂覆蓋骨折端。生物力學(xué)所得髓內(nèi)針拔出力試驗組與對照組分別為127.8±10.0N和110.9±7.9N,具有明顯差異(P=0.009),而兩組間骨痂最大牽拉力無明顯差別(P=0.76)。從Micro-CT所得二維和三維圖像可觀察到明顯的髓腔內(nèi)成骨,BMD與BVF兩組
8、間均有明顯差異。病理學(xué)圖像分析所得的骨痂體積比有明顯差異(P=0.00019)。結(jié)論:根據(jù)實驗所得結(jié)果,可以證實低彈性模量髓內(nèi)針內(nèi)固定的Ti-24Nb-4Zr-7.9Sn實驗組與Ti-6Al-4V對照組相比,在手術(shù)后的第四周,實驗組脛骨髓腔內(nèi)有較多的新骨形成,但是對于脛骨骨折愈合的影響并無差異。總之,通過本實驗可以證實,低彈性模量金屬植入材料對于周圍成骨具有明顯的促進作用。
2.表面規(guī)則微形態(tài)低彈性模量鈦合金植入物對于兔脛骨內(nèi)
9、成骨的影響
目的:結(jié)合前一實驗與本課題組前期實驗的結(jié)果,我們計劃進一步對比并驗證不同表面以及處于不同生物應(yīng)力條件下對于體內(nèi)成骨的影響。將分別帶有50μm規(guī)則微形態(tài)表面和光滑表面的Ti-24Nb-4Zr-7.9Sn與Ti-6Al-4V鈦合金內(nèi)植物植入兔脛骨中,觀察手術(shù)后4周時表面新骨生成的情況。方法:實驗選用新西蘭大白兔5只,將Ti-24Nb-4Zr-7.9Sn(wt%)和Ti-6Al-4V(wt%)兩種鈦合金材料采用鑄造和機械
10、加工的方法制成制備成長0.5cm,厚1.0mm的正方形基片,在分別加工出50μm規(guī)則微形態(tài)表面和光滑表面,作為實驗用的植入物,植入于脛骨中段。其中左側(cè)兩個開槽均放入Ti-24Nb-4Zr-7.9Sn植入物,右側(cè)兩個開槽均放入Ti-6Al-4V植入物;雙側(cè)脛骨上方的兩個開槽均放入光滑表面植入物,下方的兩個開槽均放入規(guī)則微紋理表面植入物。術(shù)后當(dāng)日及術(shù)后各周拍脛骨正側(cè)位片,以確定內(nèi)固定位置。手術(shù)后4周時,處死的動物,取出脛骨標(biāo)本分別使用Mic
11、ro-CT檢測BMD與BVF;再進行組織病理學(xué)分析,MMA硬組織包埋,硬組織切片,而后進行顯微X線片觀察、白色背景光視野觀察、偏振光視野觀察以及甲苯胺蘭染色后觀察,并進行計算機輔助的圖像分析計算骨痂面積比。數(shù)據(jù)統(tǒng)計采用SPSS12.0進行雙尾配對t檢驗,P值取0.05。結(jié)果:從Micro-CT所得圖像可觀察到明顯的表面成骨灰度影像,所測得的BMD與BVF進行統(tǒng)計后發(fā)現(xiàn):在材料相同時,規(guī)則微紋理表面成骨較好,而表面相同時,低彈性模量鈦合金
12、周圍成骨情況良好,Ti-6Al-4V植入物周圍發(fā)生骨質(zhì)吸收現(xiàn)象。分別通過顯微X線片觀察、白色背景光視野觀察、偏振光視野觀察以及甲苯胺蘭染色后觀察,一方面可以證實Micro-CT所得表面灰度影像確實為骨組織影像,另一方面也再次驗證了Micro-CT截面圖中所得到的結(jié)果。甲苯胺蘭染色后,經(jīng)過圖像分析所得的骨痂體積比(BVF)與Micro-CT檢測所的結(jié)果接近。結(jié)論:根據(jù)實驗所得結(jié)果,可以證實在材料相同的前提下,50μm的規(guī)則微紋理與光滑表面
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