解毒消癰方藥對潰瘍性結(jié)腸炎大鼠的作用及其抗炎機理的研究.pdf

1、目的：潰瘍性結(jié)腸炎（UlecartiveColitis，UC）又稱非特異性潰瘍性結(jié)腸炎，病變主要位于結(jié)腸的粘膜層和粘膜下層，且以炎癥和潰瘍?yōu)橹?，多先累及直腸和遠端結(jié)腸，但可向近端擴展，以至遍及整個結(jié)腸。臨床表現(xiàn)為腹痛、腹瀉、粘液膿血便等，病程遷延，反復發(fā)作。單純西醫(yī)治療容易復發(fā)，副作用較大。UC屬于中醫(yī)的“泄瀉”、“久痢”、“血便”等范疇，中醫(yī)治療本病有著悠久的歷史和豐富的經(jīng)驗。
　　 李佃貴教授提出從“濁毒”論治的學術新觀點，

2、指出脾虛不運，痰濕久羈、釀熱而致濁毒為潰瘍性結(jié)腸炎的主要病理機制，制定化濁解毒、健脾消癰的治療法則及解毒消癰方藥處方。解毒消癰方藥是李佃貴教授治療UC的經(jīng)驗方，由白頭翁、黃連、廣木香、白芍、當歸、秦皮、薏苡仁、黃柏、地榆、甘草等組成，功效為化濁解毒，健脾消癰。本研究旨在觀察解毒消癰方藥對實驗性大鼠潰瘍性結(jié)腸炎的作用以及對UC大鼠血清中促炎因子TNF-α和IL-1β含量的影響，探討解毒消癰方藥抗炎的可能機理，為解毒消癰方藥治療潰瘍性結(jié)腸炎

3、提供理論支持。
　　 方法：SD大鼠60只，雌性，隨機分為6組，每組10只。分別為正常組、模型組、柳氮磺胺吡啶組、解毒消癰方藥大、中、小劑量組。除正常組外，其余大鼠均以2，4，6-三硝基苯磺酸（TNBS）/乙醇復制潰瘍性結(jié)腸炎模型。造模后第3天，解毒消癰方藥采用大、中、小三個劑量（18.3g/kg、9.2g/kg、4.60g/kg）給藥治療，以及陽性藥柳氮磺胺吡啶（0.5g/kg）進行治療，模型組及正常組每日以蒸餾水灌胃10ml

4、/kg。連續(xù)10天。每日觀察大鼠的體重變化、大便性狀和隱血情況。第11天分別取各組大鼠結(jié)腸組織，計數(shù)潰瘍個數(shù)、測量潰瘍總面積、并計算組織損傷積分，光鏡下觀察腸粘膜組織炎癥、水腫和充血程度（分級法）。采血并制備血清樣本，采用雙抗體夾心ABC-ELISA法檢測血清樣本中IL-1β、TNF-α的含量。所得實驗數(shù)據(jù)使用SPSS11.5統(tǒng)計軟件處理，P<0.05有統(tǒng)計學意義。
　　 結(jié)果：
　　 1、造模大鼠均懶動，少食，毛色不光

5、潔，嗜臥扎堆，拱背，反應不靈敏，體重下降，大便次數(shù)增多，稀便，部分大鼠出現(xiàn)肉眼血便。
　　 2、模型組腸粘膜出現(xiàn)大小不等的潰瘍，光鏡下顯示炎癥程度較重。大、中劑量組及SASP組的潰瘍個數(shù)分別為0.8±0.79、1.5±0.53、1.6±0.70，模型組潰瘍個數(shù)為2.4±0.84.大、中劑量組及SASP組與模型組相比差異顯著，均具有統(tǒng)計學意義（p<0.05）；解毒消癰方藥大劑量組與SASP組相比差異顯著，有統(tǒng)計學意義（p<0.05

6、）；解毒消癰方藥中劑量組與SASP組相比差異不明顯（p>0.05）；解毒消癰方藥小劑量組潰瘍個數(shù)為2.1±0.74與模型組相比差異不明顯（p>0.05）。
　　 解毒消癰方藥大、中劑量組及SASP組的潰瘍面積分別為3.56±1.03m㎡和7.73±2.37 m㎡和6.38±2.72 m㎡，模型組潰瘍面積為12.91±2.48 m㎡。大、中劑量組及SASP組與模型組相比差異顯著，均具有統(tǒng)計學意義（p<0.05）；解毒消癰方藥大劑量

7、組與SASP組相比差異顯著，有統(tǒng)計學意義（p<0.05）；解毒消癰方藥中劑量組與SASP組相比差異不明顯（p>0.05）；解毒消癰方藥小劑量組的潰瘍面積11.47±5.09 m㎡與模型組相比差異不明顯（p>0.05）。
　　 解毒消癰方藥大、中劑量組及SASP組的組織損傷積分分別為1.6±0.52、2.8±0.79、2.3±0.82，模型組的組織損傷積分為3.9±0.88.大、中劑量組及SASP組與模型組相比差異顯著，均具有統(tǒng)計

8、學意義（p<0.05）。解毒消癰方藥大劑量組與SASP組相比差異顯著，有統(tǒng)計學意義（p<0.05）；解毒消癰方藥中劑量組與SASP組相比差異不明顯（p>0.05）；解毒消癰方藥小劑量組的組織損傷積分為3.6±1.01與模型組相比差異不明顯（p>0.05）。
　　 光鏡下觀察解毒消癰方藥大、中劑量組及SASP組大鼠結(jié)腸粘膜的炎癥程度與模型組相比差異顯著，均具有統(tǒng)計學意義（p>0.05），解毒消癰方藥大劑量組與SASP組相比差異顯著

9、，有統(tǒng)計學意義（p<0.05）；解毒消癰方藥中劑量組與SASP組相比差異不明顯（p>0.05）；解毒消癰方藥小劑量組與模型組相比差異不明顯（p>0.05）。
　　 3、大鼠血清TNF-α及白介素-1β的含量
　　 TNF-α的含量：模型組與正常組TNF-α的含量分別為29.61±5.41、16.28±1.99，模型組與正常組相比差異顯著，有統(tǒng)計學意義（P<0.05）；解毒消癰方藥大、中劑量組及SASP組TNF-α含量分別

10、為16.81±2.51、20.49±4.54、21.23±5.24與模型組血清相比差異顯著，均有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。解毒消癰方藥大劑量組與SASP組相比差異顯著，有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。解毒消癰方藥中劑量組與SASP組相比無顯著差別（P>0.05）。解毒消癰方藥小劑量組TNF-α的含量為25.81±2.96與模型組相比差異不顯著（P>0.05）。
　　 IL-1β的含量：模型組與正常組IL-1β的含量分別為12.3

11、4±1.21、7.94±0.52，模型組與正常組相比差異顯著，有統(tǒng)計學意義（P<0.05）；解毒消癰方藥大、中劑量組及SASP組IL-1β含量分別為7.93±0.54、9.84±1.35、10.50±1.39與模型組相比差異顯著，均具有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。解毒消癰方藥大劑量組與SASP組相比差異顯著，有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。解毒消癰方藥中劑量組與SASP組相比無顯著差別（P>0.05）。解毒消癰方藥小劑量組IL-1β的含量

12、為12.04±1.14與模型組相比差異不顯著（P>0.05）。
　　 結(jié)論：
　　 1、三硝基苯磺酸（TNBS）/乙醇復制潰瘍性結(jié)腸炎模型成功。本研究首次提出脾虛濕勝，濁毒內(nèi)蘊是潰瘍性結(jié)腸炎的中醫(yī)病理機制，制定出化濁解毒、健脾消癰的治療法則及解毒消癰方藥處方。證實了解毒消癰方藥對實驗性UC大鼠有很好的治療作用。
　　 2、解毒消癰方藥能顯著改善造模大鼠癥狀，表現(xiàn)為治療后體重增加，大便次數(shù)逐漸恢復正常，稀便及便血癥