基因多態(tài)性與胸心外科相關(guān)疾病易感性的關(guān)聯(lián)研究.pdf

1、本研究采用病例對照研究方法，對VEGF、NFATcl等基因的功能性SNPs單獨或聯(lián)合與先天性心臟病遺傳易感性的關(guān)系進(jìn)行研究，以研究先天性心臟病的發(fā)病機制和發(fā)現(xiàn)與我國人群先天性心臟病相關(guān)的危險基因型，并將其作為分子標(biāo)志物用于篩選高危人群或易感個體從而為實施目標(biāo)明確的個體預(yù)防等方面具有重要的理論和實踐意義。 1.血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)與先天性心臟病發(fā)病風(fēng)險的病例對照研究采用以醫(yī)院為基礎(chǔ)的病例對照研究，采用聚合酶鏈反應(yīng)-限制性片

2、段長度多態(tài)性(Polymerase Chain Reaction-Restriction FragmentLength Polymorphism，PCR-RFLP)的方法檢測VEGF基因型；使用酶聯(lián)免疫吸附試驗enzyme linked immu-nosorbcnt assay(ELISA)方法，檢測病例組和對照組血漿中VEGF水平，結(jié)果顯示，先天性心臟病患者的血漿VEGF平均水平為252.85(±200.88)ng/L，顯著高于對照組

3、的平均水平21 1.32(±206，97)ngm(P=0.024)。同時按照先天性心臟病并發(fā)癥如紫紺型心臟病和先天性心臟病肺動脈高壓進(jìn)行分類，發(fā)現(xiàn)血漿VEGF平均水平在肺動脈高壓患者中273.12(+233.57)ngL和43例紫紺型心臟病患者314.70(+_291.75)ng/L大于288例對照中211.32(±206.97)ng/L，P=0.020和P=0.030，而血漿平均VEGF水平在其它92例先天性心臟病和288例非先心對照

4、中的差異并不明顯(p=0.61 1)，同時我們比較了病例和對照中不同基因型組血漿VEGF水平，在四個不同位點中血漿VEGF水平未發(fā)現(xiàn)明顯差別。 2.活化T細(xì)胞的核因子(NATcl)基因多態(tài)性與先天性心臟病膜周部室間隔缺損遺傳易感性的病例對照研究活化T細(xì)胞的核因子(NATcl)在瓣膜和間隔發(fā)育中起重要作用，NFATcl的多態(tài)性改變可能引起NFATcl表達(dá)的差異，因此有可能與間隔缺損或瓣膜缺損有關(guān)，本病例對照研究采用聚合酶鏈反應(yīng)(P

5、olymerase Chain Reaction，PCR)的方法檢測NFATcl短重復(fù)序列S/L基因型，采用聚合酶鏈反應(yīng).限制性片段長度多態(tài)性(PolymeraseChain Reaction-Restriction Fragment Length Polymorphism，PCR-RFLP)的方法檢測NFATcl Cys751Gly基因型，共檢測了膜周部室間隔缺損病例217名和非先心對照557名，運用Logistic回歸模型分析NFA

6、Tcl基因型與先天性心臟病膜周部室間隔缺損發(fā)生危險因素的關(guān)系 3.ETlTaql多態(tài)性與先天性心臟病易感性關(guān)系的研究內(nèi)皮素1(Etl)是由內(nèi)皮和平滑肌細(xì)胞產(chǎn)生的強大的血管收縮肽，在不同的組織內(nèi)均發(fā)現(xiàn)存在Etl，可能與血管收縮調(diào)節(jié)、細(xì)胞增殖等有關(guān)，而研究發(fā)現(xiàn)，Etl和其G蛋白耦聯(lián)的受體在正常胚胎發(fā)育過程中起重要作用，與神經(jīng)嵴細(xì)胞的發(fā)生有關(guān)，因此有可能與先天性心臟病的易感性有關(guān)。Etl是由EDNl基因編碼的，其中Etl Taql多態(tài)

7、性為內(nèi)含子4的8000位點T/C的轉(zhuǎn)換，可能引起Etl表達(dá)的差異，因此可能與先天性心臟病的易感性有關(guān)，本病例對照研究采用聚合酶鏈反應(yīng).限制性片段長度多態(tài)性(Polymerase ChainReaction-Restriction Fragment Length Polymorphism，PCR-RFLP)的方法，檢測了Etl Taql基因型與先天性心臟病膜周部室間隔缺損發(fā)生危險因素的關(guān)系，共檢測了膜周部室間隔缺損病例217名和非先心對照

8、557名，Logistic回歸分析表明與Etl Taql，TT基因型相比，攜帶Etl Taql CC等位基因顯著降低先天性心臟病膜周部室間隔缺損發(fā)病危險(CC基因型的調(diào)整OR=0.43，95％CI=0.20-0.94). 4.亞甲基四氫葉酸還原酶基因MTHFR及相關(guān)基因多態(tài)性與先天性心臟病易感性關(guān)系的研究母親高同型半胱氨酸血癥可導(dǎo)致后代先天性心臟病發(fā)生的危險性增加，補充葉酸能降低血漿同型半胱氨酸水平，減少先天性心臟病的發(fā)病風(fēng)險

9、。MTHFR是葉酸代謝通路中一種重要的酶，研究發(fā)現(xiàn)MTHER基因C677T多態(tài)與MTHFR酶的活性有明顯關(guān)系，MTHFRC677T多態(tài)性改變可導(dǎo)致其編碼的代謝酶熱穩(wěn)定性降低，從而影響葉酸-同型半胱氨酸代謝，與先天性心臟病的危險因素有關(guān).研究發(fā)現(xiàn)，MTHFRC667T基因多態(tài)性與先天畸形有關(guān)，胎兒攜帶MTHFR667TT基因型增加胎)L2.9倍的神經(jīng)管畸形發(fā)生率，同時胎兒MTHER C677T基因多態(tài)性和先天性心臟病發(fā)病風(fēng)險有關(guān)，胎兒攜帶

10、TT基因型與肺動脈瓣狹窄，左心發(fā)育不良綜合癥，主動脈狹窄，主動脈瓣狹窄和主動脈瓣下狹窄的危險因素有關(guān).同時，葉酸通路的其它多態(tài)性位點如MTHFR A1298C、MTHFR G1793A、MTHFD T401C、MTHFD G1958A可能與胎兒葉酸代謝有關(guān)，與先天性心臟病的危險因素有關(guān)。 第二部分基因多態(tài)性與肺癌易感性關(guān)系的病例對照 【目的】研究細(xì)胞周期調(diào)控相關(guān)基因TP53 rS1042522、p27 rs7330

11、、p21 rSl801270、CHK2 rs2236141等多態(tài)性位點在中國人群肺癌患者及健康對照中的分布，以研究各基因型與肺癌易感性的關(guān)系。 【方法】以醫(yī)院為基礎(chǔ)的病例對照研究方法；選擇經(jīng)組織學(xué)確診的500例新發(fā)肺癌病例及性別、年齡和地區(qū)頻數(shù)匹配的517例人群對照；通過Illumina的方法檢測包含TP53 rsl042522、p27 rs7330、p21rsl801270、CHK2 rs2236141共9個基因12個位點的基

12、因型。用多元logistic回歸模型計算各不同基因型人群患肺癌的風(fēng)險(OR)及其95％可信區(qū)間(95％CI)。 【結(jié)果】 1、各位點基因型在肺癌病例組與對照組中的分布TP53 rs1042522、p27 rs7330、p21rsl801270、p15 rs3088440、CHK2rs2236142、CCNBl rsl64390,CCND3 rs9529、CDC25A rs3731485、CDC25B rs3761218、

13、CDC25B rs61 16042、CDC25B rs3761220共1 1個位點的各基因型在病例組和對照組中的分布無顯著性差異。CHK2rs2236141的三種基因型頻率在病例組中分別為71.8％(GG)，26.0％(GT)和2.2％(TT)，而在對照組中分別為65.9％(GG)。33.7％(GT)和3.5％(TT)，兩組存在顯著性差異(P=0.009)。 2、多因素Logistic回歸分析在調(diào)整了性別、年齡和吸煙等因素和腫瘤

14、家族史后，與攜帶CHK2 rs2236141 GG基因型者比較，攜帶CHK2 rs2236141 GT基因型者患肺癌的風(fēng)險顯著減少了36％(校正OR=0.64，95％CI=0.48-0.84)，而攜帶CHK2 rs2236141 TT基因型者患肺癌的風(fēng)險則減少了54％(校正0R=0.46，95％CI=0.21-1.02).而攜帶CHK2rs2236141刪聯(lián)合基因型者患肺癌的風(fēng)險則減少了38％(校正OR=0.62，95％CI-0.47-

15、0.81).但CHK2基因rs2236142位點的多態(tài)性與肺癌的患病風(fēng)險無顯著性關(guān)聯(lián)。 3、分層分析 以年齡、性別、吸煙史、腫瘤家族史及病理類型對CHK2rs2236141多態(tài)性位點與肺癌的關(guān)聯(lián)進(jìn)行分層分析。與攜帶CHK2rs2236141 GG基因型者比較，在年齡>60歲的人群中、攜帶CHK2rs2236141GT/TT合基因型可以使其患肺癌的風(fēng)險減少0.48倍(95％CI=0.35-0.78)；在年齡<60歲的人群中

16、、攜帶CHK2 rs2236141GT/TT聯(lián)合基因型可以使其患肺癌的風(fēng)險減少O.27倍(95％CI=0.50-1.06)；在男性中、攜帶CHK2 rs2236141 GT/TT聯(lián)合基因型可以使其患肺癌的風(fēng)險減少0.28倍(95％CI=0.53-0.97)；在女性中、攜帶CHK2 rs2236141 GT/TT聯(lián)合基因型可以使其患肺癌的風(fēng)險減少0.67倍(95％CI=0.16-0.67)；在無吸煙史人群中、攜帶CHK2rs2236141

17、 GT/TT聯(lián)合基因型可以使其患肺癌的風(fēng)險減少0.46倍(95％CI=0.53.0.86)；在有吸煙史人群中、攜帶CHK2 rs2236141GT/TT聯(lián)合基因型可以使其患肺癌的風(fēng)險減少0.36倍(95％CI=0.45-0.91)；在無腫瘤家族史人群中、攜帶CHK2 rs2236141 GT/TT聯(lián)合基因型可以使其患肺癌的風(fēng)險減少0.30倍(95％CI=0.51-0.95)：在有腫瘤家族史人群中、攜帶CHK2 rs2236141 GTT

18、T聯(lián)合基因型可以使其患肺癌的風(fēng)險減少0.57倍(95％CI=0.23-0.81)；病理類型的分層發(fā)現(xiàn)在腺癌和鱗癌中、攜帶CHK2 rs2236141 GT/TT聯(lián)合基因型可以使其患肺癌的風(fēng)險減少，分別是腺癌減少0.45倍(95％CI=0.38-0.78)、鱗癌減少O.48倍(95％CI=0.33-0.81). 【結(jié)論】CHK2基因的多態(tài)性rs2236141位點可能與中國漢族人群肺癌遺傳易感性有關(guān)，有必要進(jìn)一步進(jìn)行功能研究的驗證。