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文檔簡介
1、本研究以福建省道地藥材澤瀉為研究對象,采用硅膠層析、中壓制備液相、質(zhì)譜引導的高壓制備液相等技術手段對澤瀉化學成分進行了系統(tǒng)分析,采用液質(zhì)聯(lián)用和一測多評技術進行澤瀉的質(zhì)量控制研究,運用均勻設計法對其利尿作用活性成分組合進行優(yōu)化研究。主要開展了以下研究內(nèi)容:
1.采用軸向壓縮層析柱結合-MPLC、pHPLC、質(zhì)譜引導-pHPLC等多種分離純化技術分離制備澤瀉中主要活性成分。共分離得到24種化合物:十七烷酸、棕櫚酸、二十烷酸、β-谷
2、甾醇、11-去氧澤瀉醇B、23-乙酰澤瀉醇B、澤瀉醇B、澤瀉醇G、23-乙酰澤瀉醇L、24-乙酰澤瀉醇A、澤瀉醇A、24-乙酰澤瀉醇F、澤瀉醇L、13,17-環(huán)氧-23-乙酰澤瀉醇B、13,17-環(huán)氧澤瀉醇B、23-乙酰澤瀉醇C、澤瀉醇F、13,17-環(huán)氧-24-乙酰澤瀉醇A、13,17-環(huán)氧澤瀉醇A、16-羰基-11-脫水澤瀉醇A、澤瀉醇C、16-羰基-24-乙酰澤瀉醇A、16-羰基澤瀉醇A和16-羰基-11-去氧澤瀉醇A。初步探明了
3、澤瀉的物質(zhì)基礎。
2.首先采用HPLC-DAD-Q-TOF MS定性出澤瀉中25個成分,通過與對照品比對其紫外、精確分子量和質(zhì)譜裂解規(guī)律,鑒定出21種三萜類化合物,另外4種(其中16-羰基-11-去氧澤瀉醇A為新化合物)通過比對其紫外、精確分子量和質(zhì)譜裂解規(guī)律,被推斷出來。其次建立了UPLC-QqQ MS的定量分析方法,并應用到20批主產(chǎn)地澤瀉藥材的定量測定中。進一步闡明不同產(chǎn)地澤瀉的內(nèi)在化學成分的異同。
3.建立了
4、一測多評(QAMS)的澤瀉多指標質(zhì)量控制方法,采用HPLC法,以23-乙酰澤瀉醇B為內(nèi)參物,計算澤瀉醇A、24-乙酰澤瀉醇A和澤瀉醇B的相對校正因子,并利用該校正因子計算含量,同時與采用外標法測定4個三萜類成分的含量進行比較。結果:建立的校正因子重現(xiàn)性良好,31批澤瀉藥材中4個三萜類的含量計算值與外標法實測值間(RSD≤3.52%)無顯著差異。證明建立的一測多評法穩(wěn)定、準確,可用于澤瀉三萜類成分的質(zhì)量控制。解決了澤瀉質(zhì)量控制中對照品難得
5、,貨源不足或價格昂貴等問題。
4.采用代謝籠法研究澤瀉三萜類成分的利尿作用,得出三萜類成分是其利尿藥效物質(zhì)基礎。在遵循組分配伍研究設計的基礎上,采用均勻設計法,以尿量為主要藥效指標,研究澤瀉利尿作用。優(yōu)化出最佳的利尿活性組合23-乙酰澤瀉醇B:澤瀉醇B:24-乙酰澤瀉醇A:澤瀉醇A:23-乙酰澤瀉醇C(7.4∶4.4∶2.0∶1.4∶1.1),并進行三次驗證,結果優(yōu)化的最優(yōu)組合與軟件計算的預期值接近,結合建澤瀉、川澤瀉含量測定
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