紅霉素和鼻淵舒對銅綠假單胞菌體外生物膜形成抑制作用研究.pdf

1、目的：
　　 觀察大環(huán)內(nèi)酯類藥物紅霉素及中藥制劑鼻淵舒口服液在體外對銅綠假單胞菌生物膜形成的抑制作用，及對已經(jīng)形成的銅綠假單胞菌生物膜的清除作用。
　　 方法：
　　 采用3株臨床分離的銅綠假單胞菌，利用平板法胰酶大豆肉湯-硅膠片系統(tǒng)，在體外試建立細菌生物膜的模型，連續(xù)培養(yǎng)7天后用銀染法及掃描電子顯微鏡鑒定，選出易形成生物膜的1株菌株進行隨后的實驗。分別用濃度為1/16MIC、1/4MIC、1MIC、4MIC的紅

2、霉素及以1:5、1:10、1:20、1:40倍比稀釋的鼻淵舒口服液同時與此菌株在胰酶大豆肉湯-硅膠片系統(tǒng)中連續(xù)培養(yǎng)7天，使藥物作用于尚未形成生物膜的銅綠假單胞菌，用銀染法及震蕩-活菌計數(shù)法觀察上述藥物對生物膜形成的抑制作用。菌落計數(shù)結(jié)果用均數(shù)±標準差表示，計數(shù)結(jié)果用SAS9.1軟件進行統(tǒng)計，采用單因素方差分析進行兩兩比較的檢驗，以α=0.05為檢驗水準。及用上述不同濃度的紅霉素及鼻淵舒作用于此菌株已在胰酶大豆肉湯-硅膠片系統(tǒng)中培養(yǎng)7天的

3、成熟銅綠假單胞菌生物膜，24小時后銀染法觀察其對已形成的生物膜的清除作用。
　　 結(jié)果：
　　 3株銅綠假單胞菌在胰酶大豆肉湯.硅膠片系統(tǒng)中培養(yǎng)7天后，銀染結(jié)果示其中1株銅綠假單胞菌在硅膠片上形成了穩(wěn)定細菌生物膜，并與掃描電鏡觀察結(jié)果一致。在此后的實驗中，紅霉素及鼻淵舒表現(xiàn)出在體外能抑制此銅綠假單胞菌形成成熟的細菌生物膜，銀染結(jié)果光學顯微鏡觀察示藥物作用后硅膠片上的黑色絮狀物較陽性對照明顯減少，且抑制作用隨藥物濃度的增加

4、而加強。連續(xù)稀釋法菌落計數(shù)結(jié)果表明，不同濃度的紅霉素及鼻淵舒均能在成熟的細菌生物膜形成前抑制細菌生長，與陽性對照組比較差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。但紅霉素及鼻淵舒對已形成的銅綠假單胞菌細菌生物膜的清除作用不明顯。
　　 結(jié)論：
　　 1、用平板法胰酶大豆肉湯-硅膠片系統(tǒng)可以在體外建立穩(wěn)定的銅綠假單胞菌生物膜。銀染法可以對形成的細菌生物膜的形態(tài)進行檢驗。振蕩一活菌計數(shù)可用于生物膜內(nèi)細菌數(shù)量的定量分析。