仙鶴草水提液對細(xì)胞毒藥物所致血小板減少的促巨核細(xì)胞增殖作用及臨床觀察.pdf

1、[目的]：觀察仙鶴草水提液對環(huán)磷酰胺所致血小板減少小鼠及使用泰索帝聯(lián)合表阿霉素治療的乳腺癌患者的促血小板生成作用，通過檢測小鼠細(xì)胞毒藥物作用后骨髓造血調(diào)控因子白介素-1a：白介素-3：白介素6；白介素-11，TPO單個核細(xì)胞mRNA表達(dá)水平，以及乳腺癌患者外周血白介素-1a；白介素-3；白介素6；白介素-11，TPO含量水平，分析仙鶴草水提液治療化療后血小板減少的效用，進(jìn)一步探討其作用機(jī)理。 [方法]：1、健康小鼠144只，隨機(jī)

2、分成空白對照組、模型組、巨和粒組、中藥低劑量組、中藥中劑量組、中藥高劑量組共6組。使用環(huán)磷酰胺制作血小板減少模型，造模成功后分別使用巨和粒及中藥治療14天。分別于第7、14、21天股靜脈取血計數(shù)血小板，制作股骨病理切片以觀察造血面積和巨核細(xì)胞計數(shù)；提取骨髓單個核細(xì)胞，半定量RT-PCR法檢測患者骨髓單個核細(xì)胞白介素-1a；白介素-3；白介素6；白介素-11，TPOmRNA的表達(dá)水平。 2、選取82例使用泰索帝聯(lián)合表阿霉素化療的血

3、小板減少乳腺癌患者，根據(jù)藥物處理情況隨機(jī)分為仙鶴草水提液組(觀察組)、巨和粒組(對照組)和空白對照組。患者化療后接受仙鶴草水提液或巨和粒治療或不進(jìn)行藥物干預(yù)。觀察患者外周血血小板計數(shù)水平、回升至＞100×109/L平均時間，ELISA方法檢測外周血白介素-1a；白介素-3；白介素6；白介素-11，TPO含量。 [結(jié)果]：一、動物實驗1、各組血小板計數(shù)于實驗第14、21天較造模后明顯升高。第14天巨和粒組、高劑量組與模型組相比差異

4、顯著(P＜0.01)，中劑量組、低劑量組與模型組相比無明顯差別(P＞0.05)。第21天各組與模型對照組血小板計數(shù)比較差異有顯著性(P＜0.01)。 2、鏡下形態(tài)觀察造血組織容量，第14、21天各組造血面積均高于模型組，第14天巨和粒組和各級中藥組相比無明顯差別(P＞0.05)；第21天巨和粒組、中藥高、中劑量組造血面積與模型組相比有明顯變化(P＜0.01)，中藥低劑量組與模型組相比無差異(P＞0.05)。 3、各組巨核

5、細(xì)胞數(shù)目治療后均高于模型組，第14、21天巨和粒組和各級中藥組均高于模型組，差異有顯著性(P＜0.01)。 4、小鼠骨髓骨髓單個核細(xì)胞IL-1α、IL-3、IL-6、IL-11、TPO表達(dá)： 4.1治療后各組IL-1α表達(dá)水平無明顯差異(P＞0.05)。 4.2中藥各組IL-3第14天均高于空白對照組、模型組、巨和粒組，與空白對照組相比有明顯差異(P＜0.01、P＜0.01、P＜0.05)：第21天中藥治療各組明

6、顯升高，高、中劑量組與空白對照組相比有明顯差異(P＜0.01)，與模型組、巨和粒組相比有差異(P＜0.01、P＜0.05)；低劑量組與空白對照組、模型組、巨和粒組相比無差異(P＞0.05)。 4.3治療后中藥各組IL-6表達(dá)水平似乎均低于空白對照組、模型組、巨和粒組，但無統(tǒng)計學(xué)差異(P＞0.05)。 4.4治療后各組IL-1l表達(dá)中藥各組均高于空白對照組、模型組、巨和粒組，且呈劑量相關(guān)性，第14天中藥高、中劑量組與空白對

7、照組相比有差異(P＜0.05)，低劑量組與空白對照組相比無差異(P＞0.05)。第21天中藥高、中劑量組與空白對照組相比有差異(P＜0.01、P＜0.05)，中藥低劑量組與空白對照組相比無差異(P＞0.05)；第14、21天中藥高、中劑量組與巨和粒組相比有明顯差異(P＜0.01)，低劑量組與巨和粒組相比有差異(P＜0.05)。 4.5治療后各組TPO表達(dá)結(jié)果：第14天中藥中、高劑量組與空白對照組、模型組相比有顯著差異(P＜0.0

8、1)：第21天中藥各組與空白對照組相比差異有顯著性(P＜0.01)，中藥中、高劑量組與模型組相比差異有顯著性(P＜0.01)，中藥低劑量組與模型組相比有差異(P＜0.05)。 二、臨床觀察 1、各組治療后血小板計數(shù)均較治療前有所升高，治療后觀察組與空白對照組相比有差異(P＜0.05)、對照組與空白對照組相比差異有顯著性(P＜0.01)。 2、回升至＞100×109/L平均時間觀察組、對照組均少于空白對照組，觀察組

9、、對照組與空白對照組相比差異有顯著性(P＜0.01)。 3、治療后白介素-1α均較治療前有所下降，治療后觀察組、對照組與空白對照組相比差異有顯著性(P＜0.01)。 4、觀察組、空白對照組治療后白介素-3均較治療前升高，對照組較治療前下降;治療后各組兩兩相比差異有顯著性(P＜0.01)。 5、對照組、空白對照組治療后白介素-6均較治療前升高，觀察組較治療前下降;治療后觀察組、空白對照組與對照組相比差異有顯著性(P

10、＜0.01);觀察組與空白對照組相比無差異(P＞0.05)。 6、各組治療后白介素-11均較治療前有所升高，治療后各組兩兩相比差異有顯著性(P＜0.01)。 7、各組治療后TPO均較治療前有所升高，治療后觀察組與空白對照組相比差異有顯著性(P＜0.01)、對照組與空白對照組相比差異有顯著性(P＜0.05)。 [結(jié)論]：1.中藥仙鶴草水提液具有促進(jìn)骨髓巨核細(xì)胞增殖，升高血小板的作用，其作用強(qiáng)度與藥物濃度相關(guān)。2.小

11、鼠實驗表明中藥仙鶴草水提液可以提高小鼠骨髓單個核細(xì)胞白介素-3、白介素-11及TPO的mRNA表達(dá)，其促進(jìn)血小板的升高可能是通過調(diào)節(jié)造血調(diào)控因子白介素-3、白介素-11及TPO。3.臨床觀察表明，使用仙鶴草水提液后有明顯的升高血小板作用，并且患者外周血白介素-3、白介素-11及TPO含量均有升高，推測仙鶴草水提液具有提高白介素-3、白介素-11及TPO作用，從而升高血小板。4.白介素-11可以提高小鼠骨髓單個核細(xì)胞IL-6、TPO的mR