大腸癌組織細(xì)胞凋亡相關(guān)蛋白的研究.pdf

1、該項(xiàng)研究采用RT-PCR法檢測(cè)32例大腸癌及其正常組織中凋亡抑制蛋白(IAP)家族新成員survivin mRNA表達(dá);應(yīng)用Western blot技術(shù)檢測(cè)大腸癌凋亡通路中凋亡相關(guān)蛋白Bak、Smac/DIABLO、caspase-9和-3的表達(dá)水平變化,旨在探索大腸癌凋亡信號(hào)通路出現(xiàn)的異常,以闡明凋亡抑制(抗凋亡)作用在大腸癌發(fā)生發(fā)展中的重要性.研究顯示:(1)大多數(shù)凋亡信號(hào)所引發(fā)的細(xì)胞凋亡是通過下游的效應(yīng)蛋白酶caspase實(shí)現(xiàn)的,

2、位于凋亡信號(hào)下游的caspase-9可以激活凋亡信號(hào)通路匯集終端的caspase-3,引發(fā)細(xì)胞凋亡.在我們的研究中發(fā)現(xiàn)大腸癌組織中的caspase-9和-3活性明顯降低,不利于癌細(xì)胞凋亡;(2)大腸癌組織survivin mRNA陽(yáng)性表達(dá)率為62.5％,正常組織陽(yáng)性率為25％,二者有顯著的統(tǒng)計(jì)學(xué)差異.Survivin是凋亡抑制蛋白家族成員survivin過度表達(dá),不但是caspase-3的直接抑制劑,而且也能阻斷Smac/DIABLO的

3、作用.該實(shí)驗(yàn)中大腸癌survivin表達(dá)高,盡管Smac/DIABLO蛋白水平高可能也不發(fā)揮其凋亡活化作用,這從caspase-3活性降低加以證實(shí),和(3)實(shí)驗(yàn)中還發(fā)現(xiàn)Bcl-2家族中重要的促凋亡成員Bak蛋白水平降低,可能使線粒體Cytc釋放至胞液減少,不利于"凋亡體"的形成,caspase-9激活受阻,也會(huì)導(dǎo)致caspase-3活性降低,說明Bak蛋白水平下調(diào)會(huì)引起線粒體凋亡信號(hào)減弱.根據(jù)以上實(shí)驗(yàn)結(jié)果可以看出大腸癌的凋亡信號(hào)被削弱,