Graves甲亢肝損害與抗原肽運載體1基因多態(tài)性關聯(lián)性的研究.pdf

1、第一部分 Graves'disease甲亢肝損害臨床分析 目的:了解GD甲亢肝損害發(fā)生的相關因素和肝損情況及與甲狀腺功能的相關性,尋求甲亢肝損的特異表現(xiàn),以便更好的防治GD甲亢肝損害.方法:GD甲亢病例分為肝功異常組和肝功正常組,比較二組一般資料,游離甲狀腺激素水平,肝功水平等.結(jié)果:①甲亢肝損害與性別、甲腫程度及發(fā)生率、突眼與否及陽性家族史之間均無相關性;②肝功異常組的FT4水平明顯高于肝功正常組,但二者相關性并不強(OR=1.010

2、);③肝功異常以谷丙轉(zhuǎn)氨酶升高常見(70％以上),而直接膽紅素升高幅度較大(10倍以上);④肝功異常組的房顫發(fā)生率高(p=0.026).結(jié)論:GD甲亢患者不論甲功水平如何均要注意肝臟、心臟、腎臟等其它臟器的功能水平.這些臟器的損害是由于甲狀腺激素的毒性作用還是與自身免疫有關是一個值得討論的問題.第二部分 ARMS-PCR方法檢測SNP基因多態(tài)性與單核苷酸多態(tài)性 SNP即為基因發(fā)生了點突變,研究已知突變的方法有雜交法(allele-spe

3、cific oligonucleotide,ASO)、擴增法(ARMS、RFLP-PCR、LCR)及錯配修復酶裂解法(mismatch repair enzyme cleavage,MREC)等.研究已知突變的方法中ASO、MREC和LCR(ligation chain reaction)法均需要設計、合成相應的探針,一個等位基因至少就需要4種探針作點雜交,還需要有相應可檢測的放射性核素或免疫熒光等標記.這些方法成本較高,操作煩瑣,分析

4、條件嚴格.限制性內(nèi)切酶酶切長度多態(tài)性(restriction fragment length polymorphism,RFLP)法為基因位點的突變引起某區(qū)域限制性內(nèi)切酶識別位點的消失或產(chǎn)生新的識別位點,表現(xiàn)出限制性片斷長度的多態(tài)性;在目的基因片段PCR擴增后,利用多種限制性內(nèi)切酶對擴增產(chǎn)物進行酶切分型;不同的基因序列,不同的限制性內(nèi)切酶酶切擴增產(chǎn)物,電泳后產(chǎn)生不同的電泳圖譜,通過對電泳圖譜的分析,得出HLA基因多態(tài)性結(jié)果;該法簡單、敏

5、感、準確、無需同位素,但較ARMS-PCR來說仍嫌煩瑣,且分辨率低.ARMS-PCR可在PCR后直接進行電泳分型,無需酶切,且一個位點僅擴增一管既可確定其等位基因型.故ARMS-PCR以其可靠、敏感、簡便、快速、價廉、無需同位素、熒光標記等優(yōu)點為廣大研究者們所接受.第三部分 Graves甲亢肝損害與TAP1基因多態(tài)性關聯(lián)性的研究 目的:探討抗原肽運載體1(TAP1)基因在天津地區(qū)漢族人中的分布及其與Graves病、GD甲亢肝損害的關聯(lián)性

6、.方法:用擴增阻礙突變體系(ARMS)檢測TAP1基因多態(tài)性位點在106例天津地區(qū)漢族正常人、66例GD肝功正?；颊?、66例GD肝功異常患者中的分布.結(jié)果:(1)研究人群的TAP1等位基因分布、基因型分布均符合Harding-Weinberg定律;(2)天津地區(qū)漢族人TAP1 333和TAP1 637基因型、等位基因型、表現(xiàn)型頻率在正常人與GD肝功異?；颊?、GD肝功正?；颊唛g無顯著性差異(P>0.05),按性別、年齡分層后仍無顯著性差異

7、;TAP1單倍體型在三組間亦無顯著性差異;(3)天津地區(qū)漢族人TAP1 333和TAP1 637基因型、等位基因型、表現(xiàn)型頻率在正常人與GD白細胞減少患者、GD白細胞正?；颊唛g無顯著性差異(P>0.05);(4)天津地區(qū)漢族人TAP1 333和TAP1 637基因型、等位基因型、表現(xiàn)型頻率在正常人與GD突眼患者、GD無突眼患者間無顯著性差異(P>0.05).結(jié)論:TAP1基因型不能作為預測中國天津漢族人發(fā)生GD與GD肝損、突眼、白細胞減