原位雜交技術在大白菜和結球甘藍上的應用研究.pdf

1、本研究以二倍體大白菜(AA，2n=2x=20)、二倍體結球甘藍(CC，2n=2x=18)及其三個初級三體、四倍體結球甘藍(CCCC，2n=4x=36)和二倍體大白菜種間雜交獲得的異源三倍體雜種(ACC，2n=3x=28)為材料，利用間期核和中期染色體熒光原位雜交(FISH)技術，分析重復序列25S rDNA在大白菜和結球甘藍的分布特點，準確識別了A、C基因組的染色體。并分別以大白菜基因組總DNA和結球甘藍基因組總DNA為探針，對二倍體大

2、白菜、二倍體結球甘藍和異源三倍體進行基因組原位雜交(GISH)，分析雜交信號特點，探討A基因組和C基因組的親緣關系。研究結果如下： 1．25S rDNA在大白菜基因組中存在著10個25S rDNA雜交信號，它們分別位于1號長臂近中部， 2號、3號和4號長臂靠近著絲點的位置，10號染色體的隨體上，雜交信號在不同染色體上的熒光強度強弱不同。 2．25S rDNA在結球甘藍染色體上檢出了4個雜交信號，它們分別位于3號染色體短臂

3、末端和9號染色體的隨體上；在Triplo4、Triplo5和Triplo6三個甘藍初級三體上也都檢出了4個信號，信號所屬的染色體和在染色體上分布的位置與二倍體相同。 3．25S rDNA在異源三倍體間期核上檢出了9個雜交信號，中期染色體上檢出了8個雜交信號。根據信號的位置可知，它們分別位于結球甘藍的3號染色體短臂的末端和9號染色體的隨體上，以及大白菜的2號、3號和4號染色體的長臂靠近著絲點的位置和10號染色體的隨體上，不同染色體

4、上的雜交信號強弱不同。 4．分別以大白菜的基因組總DNA和結球甘藍的基因組總DNA為探針與大白菜和結球甘藍雜交，所有染色體上均有雜交信號，但是A、C基因組染色體間的雜交信號特征不同。 5．大白菜的基因組總DNA為探針在異源三倍體雜種染色體上雜交。無封阻時，28條染色體上都有清晰而強烈的雜交信號，但A、C基因組染色體間的雜交信號的特征不同；封阻適當時，有18條染色體上的信號十分微弱，其余10條染色體上的信號明顯可見，能在一