高效液相色譜法測定人血漿中茴拉西坦活性代謝產(chǎn)物ABA及其在生物等效性研究中的應(yīng)用.pdf

1、目的：建立檢測人血漿中茴拉西坦代謝產(chǎn)物對甲氧基苯甲酰胺基丁酸(ABA)的高效液相色譜方法。用此方法考察試驗(yàn)制劑和參比制劑的相對生物利用度，并評價(jià)二者是否具有生物等效性。
　　 方法：第一部分主要為ABA的血藥濃度檢測方法的建立及驗(yàn)證。以氫氯噻嗪為內(nèi)標(biāo)，血漿樣品經(jīng)液液-萃取處理。分析柱為SymmetryShield TM RP18 C18(3.9mm×150 mm，5μm)，柱溫：30℃。流動(dòng)相：20 mM甲酸胺：甲醇(83:17

2、，V/V)，流速：1.0 mL·min-1，進(jìn)樣量：20μL。紫外檢測波長250 nm。
　　 第二部分為茴拉西坦膠囊人體生物等效性研究。本研究為開放、口服給藥、隨機(jī)交叉、雙周期的單中心試驗(yàn)。20名受試者被隨機(jī)分為兩組，分別口服試驗(yàn)制劑或參比制劑。采用第一部分所建立的方法測定給藥后不同時(shí)間ABA的血藥濃度。利用DAS計(jì)算藥動(dòng)學(xué)參數(shù)并進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。主要藥代參數(shù)經(jīng)對數(shù)轉(zhuǎn)換后以多因素方差分析(ANOVA)進(jìn)行顯著性檢驗(yàn)，然后用雙向單側(cè)

3、t檢驗(yàn)和計(jì)算90％可信區(qū)間的統(tǒng)計(jì)分析方法來評價(jià)和判斷藥物間的生物等效性。
　　 結(jié)果：茴拉西坦活性代謝產(chǎn)物ABA的線性范圍為53.3～13640μg·L-1，最低定量下限為53.3μg·L-1；日內(nèi)、日間RSD不超過10.8％：平均回收率為96.9％～103.3％。
　　 參比制劑和試驗(yàn)制劑中ABA的主要藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)Cmax、Tmax、AUC0→4和AUC0→∞(均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差)分別為：6948.8±3016.8和704

4、9.3±2586.3 ng·mL-1；0.57±0.34和0.48±0.19 h；5835.9±1496.9和5770.9±1105.3 ng·h·mL-1；6008.9±1504.7和5770.9±1114.4ng·h·mL-1。受試制劑對參比制劑的相對生物利用度F(以AUC0→4作為評價(jià)依據(jù))為：102.8％±24.9％。
　　 Tmax經(jīng)非參數(shù)檢驗(yàn)，不同制劑間無顯著性差異(U=0.000，p=1.000)。AUC0→4、A

5、UC0→∞和Cmax經(jīng)對數(shù)轉(zhuǎn)換后，進(jìn)行方差分析，結(jié)果表明：兩者在不同制劑間和不同周期間差異無顯著性意義(p>0.05)。Cmax、AUC0→4和AUC0→∞雙向單側(cè)t-檢驗(yàn)結(jié)果表明thigh和tlow均大于單側(cè)t0.05。受試制劑AUC0→4和AUC0→∞的90％可信區(qū)間均未超出參比制劑相應(yīng)AUC0→4和AUC0→∞的80％～125％的范圍；受試制劑的Cmax的90％可信區(qū)間，也未超出參比制劑Cmax的70％～143％的范圍。