綠殼蛋雞輸卵管組織mRNA差異比較分析.pdf

1、目的：檢測(cè)血紅素加氧酶（Heme Oxygenase，HO-1）和膽綠素還原酶A（BLVRA）在盧氏雞和固始雞輸卵管子宮部表達(dá)量水平，分析HO-1和BLVRA在盧氏雞和固始雞表達(dá)量差異，以此為依據(jù)探索綠殼蛋的形成機(jī)理，為盧氏雞產(chǎn)綠殼蛋研究提供理論依據(jù)。
　　方法：本試驗(yàn)以24周齡產(chǎn)綠殼蛋盧氏雞和產(chǎn)褐殼蛋固始雞為素材，各隨機(jī)選取5只，采集每只雞輸卵管子宮部，根據(jù)TRial RNA提取試劑盒上的方法提取總RNA，經(jīng)過(guò)RT-PCR反轉(zhuǎn)錄

2、為cDNA，設(shè)計(jì)上下游引物，以與色素相關(guān)的HO-1和BLVRA為目的基因，選擇GAPDH作為內(nèi)參基因，通過(guò)實(shí)時(shí)熒光定量PCR，分析HO-1和BLVRA在不同品種雞的機(jī)體內(nèi)轉(zhuǎn)錄水平的差異。
　　結(jié)果：提取的總RNA，通過(guò)1％的瓊脂糖凝膠電泳檢測(cè)，28S、18S兩條帶較亮，5S條帶模糊，說(shuō)明提取的總RNA質(zhì)量較好。通過(guò)實(shí)時(shí)熒光定量PCR測(cè)的，HO-1在盧氏雞和固始雞中表達(dá)量分別為0.1581±0.0278和0.0299±0.0050；